上海仁捷生物科技有限公司

鱼脂肪酸合成酶(FAS)ELISA试剂盒技术指导

时间:2017-8-25阅读:138
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鱼脂肪酸合成酶(FAS)ELISA试剂盒

英文名称:Fish FAS ELISA Kit
实验类型:夹心法
检测范围:75 U/L – 2400 U/L
zui低检测限:10 U/L
应用范围:血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体(本产品仅供实验室科研及非临床用途)

鱼脂肪酸合成酶(FAS)ELISA试剂盒仅供研究使用

 

鱼脂肪酸合成酶(FAS)ELISA试剂盒实验目的

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中鱼脂肪酸合成酶(FAS)的含量。

有效期:6个月

保存条件:2-8℃

 

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被鱼脂肪酸合成酶(FAS)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的鱼脂肪酸合成酶(FAS)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

 

鱼脂肪酸合成酶(FAS)ELISA试剂盒组成

试剂盒组成96孔配置48孔配置备注
微孔酶标板8孔×12条8孔×6条 无
标准品0.3mL×6管0.3mL×6管
*6mL3mL
检测抗体-HRP10mL5mL
20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释
底物A6mL3mL
底物B6mL3mL
终止液6mL3mL
封板膜2张2张
说明书1份1份
自封袋1个1个

备注:

1. 标准品浓度依次为:2400、1200、600、300、150、0 U/L

2. 经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过zui大标准品浓度时,可用*将标本进行适当稀释后再进行实验。

操作步骤

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

实验结果计算

以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。

(此图仅供参考)

鱼脂肪酸合成酶(FAS)ELISA试剂盒性能

1. 检测范围:75 U/L – 2400 U/L。

2. 灵敏度:zui低检测浓度小于10 U/L。

3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。

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