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ELISA试剂盒样本前处理是酶联免疫试验中要害的一步,稍有不小心将致使试验满盘皆输。那么到底该如何才能方便的处理样本又安全呢?劲马实验为您分析ELISA试剂盒样本处理五部曲助您试验。
一、均质:
安排样本:肉、肝食品类切细,用绞肉机重复绞碎,混合均匀。
水产样本:去掉样品的非食用有些,食用有些切细,用均质器均浆;质料外表较脏时,需适当用蒸馏水清洁。
蛋类:鲜蛋去壳,蛋黄和蛋白充沛混匀。
生果、蔬菜类:先用水洗去泥沙,然后除掉外表的水分,取食用有些。
二、振动获取:
将获取溶剂参加到装有样品的具塞容器中,振动,使获取溶剂与容器内的样品充沛触摸以深化到样本安排内部,获取待测组分。
1.振动办法:振动器上进行上下、往复式振动、手摇式上下振动。
2.在安排样本中参加有机溶剂之间获取时,应边加边振动,避免安排凝聚成团,不利于获取。
三、ELISA试剂盒乳化景象:
在用有机溶剂获取过程中,假如呈现乳化景象,处理的办法有:①用细头悄悄的拌和,损坏乳化后,再重复离心。②再参加适当的获取剂,重新振动。留意离心后要确保样本的稀释倍数不变。
四、浓缩:
由于净化过程中引进的溶剂,可能会下降待测组分的浓度或许不适宜直接分析,需求去掉悉数有机溶剂。即试剂盒前处理过程中把样本在60℃氮气下吹干,再用复溶液溶解枯燥残留物。
浓缩办法:氮气吹干除杂、压缩空气吹干除杂。
留意:
1.在吹干样本之前,用甲醇清洁针头,避免杂质搅扰。
2.在吹样本时,针头应在液面上空,避免与样本触摸,避免发生穿插污染。
3.样本吹干后应当即取下,避免吹的时间过长,影响终究检查结果。
4.不一样的药物,吹干后样本的保质期不一样,提倡待样本回到室温后当即复溶。
五、净化:
经过ELISA试剂盒获取的待测组分中一般富含一些会搅扰试剂盒中抗原抗体反响的杂质或许是富含与待测物结构类似的杂质。将待测组分与杂质分离的过程,一般称为试剂盒中样本的净化。在咱们现有的试剂盒前处理办法中涉及到的zui常见的净化是:液液分配法。
比方:用复溶液溶解枯燥残留物之前先参加适当的正己烷,在参加正己烷和复溶液涡动后假如呈现乳化景象,能够60℃水浴加热,至乳化景象不见或削弱后,加大离心转速进行离心。
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