人转甲状腺素蛋白(TTR)ELISA 试剂盒
包装规格：48T/96T
检测方法：酶联免疫
检测标本：血清、血浆、细胞培养液等
本试剂盒仅供体外研究使用!
试剂盒组成
| 名 称 | 96孔配置 12孔×8条 | 48孔配置 12孔×4条 | 备 注 |
1 | 标准品（500ng/ml) | 0.5ml | 0.5ml | 稀释即用型 |
2 | 酶标包被板 | 1块 | 1块 | 已包被即用型 |
3 | 标准品稀释液 | 3ml | 3ml | 即用型 |
4 | 链霉亲和素-HRP | 6ml | 3ml | 即用型 |
5 | 30x倍浓缩洗涤液 | 20ml | 20ml | 蒸馏水稀释 |
6 | *标记抗体 | 2ml | 2ml | 即用型 |
7 | 显色剂A液 | 6ml | 3ml | 即用型 |
8 | 显色剂B液 | 6ml | 3ml | 即用型 |
9 | 终止液 | 6ml | 3ml | 即用型 |
10 | 说明书 | 1份 | 1份 | 即用型 |
11 | 封板膜 | 2张 | 2张 | 不可反复使用 |
12 | 密封袋 | 1个 | 1个 | 即用型 |
需要而未提供的试剂和器材
- 酶标仪(450nm检测波长滤光片，570nm或630nm校正波长滤光片) 。
- 洗板机（可调注液量，保证每孔洗液加至0.35ml而不溢出）。
- 超净工作台，生物安全柜，通风柜。
- 高精度单道加液器（量程为0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).
- 高精度多道加液器（8道或12道，量程为50-300μl).
- 37℃恒温箱。
- 低温离心机。
- 电冰箱（4℃,-20℃,-86℃）.
9. 漩涡混合仪，低频振荡器等
人转甲状腺素蛋白(TTR)ELISA 试剂盒 注意事项
- 从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
- 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
- 为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
- 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
- 底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
6. 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按生物废弃物处理。终止液为2M硫酸，使用时必须注意安全。
7. 各步骤加样均应使用加样器，并经常校准其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，*使用排枪加样。
8. 每次试验测定的同时做标准曲线，。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔zui高浓度的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n）。
9. 配制试剂时，要用旋涡混合仪混匀。加入孔内的试剂，充分混匀对测试结果尤为重要，使用微量振荡器(使用zui低频率)，如无微量振荡器，可在反应前手工轻轻晃动酶标板1分钟，例如做圆周动作，使加入孔中的反应液混匀。
10. 实验用酶标仪应严格按使用说明书规范操作，并在使用前充分预热。
11. 手工洗板应注意：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
样本要求
1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存或根据存放，时间做相应温度调整，但应避免反复冻融，（由于样本种类过多，每个单位处理方式不一样，本说明书不做详细介绍）。
人转甲状腺素蛋白(TTR)ELISA 试剂盒 操作程序
- 标准品的稀释：（本试剂系统提供原倍标准品一支，用户请按照说明自行在小试管中倍比稀释）按下表格执行：
250ng/ml | （5号标准品） | 120μl的原倍标准品加入120μl的标准品稀释液 |
125ng/ml | （4号标准品） | 120μl的5号标准品加入120μl的标准品稀释液 |
62.5ng/ml | （3号标准品） | 120μl的4号标准品加入120μl的标准品稀释液 |
31.2ng/ml | （2号标准品） | 120μl的3号标准品加入120μl的标准品稀释液 |
15.6ng/ml | （1号标准品） | 120μl的2号标准品加入120μl的标准品稀释液 |
- 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
- 加样:(详细操作流程请客服索要说明书）
- 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释备用。
- 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
- 显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。
- 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
- 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后10分钟以内进行。
结果判断
1. 每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值。（若不减零孔值，标准曲线的零孔应相交于Y轴）
2. 根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种熟悉应用软件来计算。
3．手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标，以平滑线连接各标准品的坐标点。通过标本的OD值可在标准曲线上查出其浓度。*使用专业制作曲线软件进行分析计算结果。
4．若标本OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。
人转甲状腺素蛋白(TTR)ELISA 试剂盒 试剂盒性能
- 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9200。
- 灵敏度：zui小可检测浓度达，1.05ng/ml。
- 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
- 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5 . 回收率：70-110%.
6. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
7. 有效期：6个月
8. 检测范围： 480ng/ml -3.9ng/ml
一、服务
我们可以根据您的应用需要，比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求，而量身定制检测试剂盒，有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。
二、ELISA检测概述
ELISA（酶联接免疫吸附反应分析）是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。 由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。
实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即：用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。目前我们对客户提供比较常用的ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法服务。
三、技术流程
双抗体夹心法(检测未知抗原) | 间接法(检测未知抗体) |
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。 | 1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。 |
四、客户须知
1、液体类标本（细胞培养上清、组织匀浆、血清、血浆、尿液、胸水、腹水、脑脊液等）；
2、样本保存：请尽早检测，2-8℃保存一天；需更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存。如需周期收集样本，请将样本及时分装标号后，置-20℃或-70℃保存；
3、请提前告诉我们：您样本的种属、样本数量、待测指标及其他特殊要求。
五、报告内容及标准
1、ELISA标准曲线；
2、详细的实验步骤；
3、完整的实验报告（试剂耗材，实验方法，实验结果及结果说明）；
4、实验进行阶段，我公司客服人员会及时向您汇报实验进程。
环保在线