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TSZelisa试剂盒基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体( 聚苯乙烯微量反应板 )表面,使酶标记的抗原-抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。
1、竞争ELISA试剂盒:此法主要用于测定小分子抗原及半抗原,其原理类似于放射免疫测定。
其基本程序为:
① 抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干
② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原(对照孔仅加酶标抗原)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干
③ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液
④ 用ELISA试剂盒检测仪测定OD值。
被结合的酶标抗原的量由酶催化底物反应产生有色产物的量来确定,如果待检溶液中抗原越多,被结合的标记抗原的量就越少,有色产物就减少,这样根据有色产物的变化就可求出未知抗原的量。此法的优点在于快速、特异性高、且可用于小分子抗原及半抗原的检测;其主要不足在于每种抗原都要进行酶标记,而且因为抗原的结构不同,还需应用不同的结合方法。此外试验中应用酶标抗原的量较多。
2、阻断ELISA
本法主要用于。该方法现已成为猪传染性胃肠炎(TGE)、猪伪狂犬病(PR)及猪胸膜肺炎(AP)的主要检测方法。
下面以AP2型抗体的阻断ELISA试剂盒检测法为例介绍其操作程序:
① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干
② 用200μl阻断缓冲液进行封闭 → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干
③ 加工作量1:4稀释被检猪血清100μl → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干
④ 加100μl工作量兔抗AP2型血清 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干
⑤ 加100μl工作量猪抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干
⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液
⑦ 用TSZelisa试剂盒检测仪测定OD值。
CDCP-O-873-10g 10g 蔗糖 标准品 CDGG-010408-97 瓶 2,6-二叔丁基对甲酚
CDCP-O-873-5g 5g 蔗糖 标准品 CDGG-010408-98 瓶 2.6-二叔丁基对甲酚
CDCP-O-965-10g 10g GPC标样-聚乙烯吡咯烷酮(Mw... CDFH-PVPR17K 1.0g 对甲苯磺suan
CDCP-O-965-5g 5g GPC标样-聚乙烯吡咯烷酮(Mw... CDFH-PVPR22K 1.0g 对甲苯磺suan(一水合物)
CDCP-O-969-1g 1g GPC标样-聚乙烯吡咯烷酮(Mw... CDFH-PVPR3500K 1.0g 对甲苯磺suan乙酯
TSZelisa试剂盒
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