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胖大海LAMP鉴定试剂盒使用方法

2022-8-30  阅读(108)

胖大海LAMP鉴定试剂盒使用方法:

一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。


1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。


2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。


3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。


4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。


5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。


6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。


二、样品 DNA 的制备


7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。


8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。


三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)


9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照(用第一步稀释得到的标准曲线系列稀释液的第 4 号做模板)。

活化转录因子6抗体

衔接蛋白β抗体

衔接蛋白γ/γ-Adaptin抗体

水通道蛋白-9抗体

膜粘连蛋白A3抗体

膜粘连蛋白 A4抗体

自噬相关蛋白8A抗体

磷酸化蛋白激酶B抗体

磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体

磷酸化蛋白激酶B抗体

脱氧胞苷脱氨酶蛋白抗体

蛋白激酶锚定蛋白13抗体

AP-1μ2抗体

肥大细胞膜抑制性受体Allergin1抗体

脑钠通道蛋白1抗体

肌动蛋白相关蛋白2/3复合亚单位B1抗体

三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体

甲胎蛋白抗体

毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体

ATP结合盒转运蛋白2抗体

肌动蛋白结合蛋白LIM蛋白3抗体

酸性钙调蛋白3抗体

磷酸化CD156b抗体




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