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上海莼试生物技术有限公司
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欧洲放线菌探针法荧光PCR检测试剂盒实验过程
2022-9-27 阅读(163)
欧洲放线菌探针法荧光PCR检测试剂盒实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μ
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测
APG4B自噬相关蛋白4B抗体
alpha Actinin 4-Loading Controlα-辅肌动蛋白4(内参)抗体
Alkaline Phosphatase碱性磷酸酶抗体
AU1 tagAU1 tag标签抗体
AEBP1脂肪细胞增强结合蛋白1
AKT1蛋白激酶B
AKT1蛋白激酶B
ANGL2血管生成素样蛋白2抗体
Angiopoietin 4血管生成素3/血管生成素4抗体
Annexin I膜粘连蛋白 I抗体
Annexin A2膜粘连蛋白 Ⅱ抗体
ATF1活化转录因子1抗体
Aquaporin 4 水通道蛋白4抗体
ATF2活化复制因子2抗体
AMPK beta 1腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体
Amylin糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽抗体
Angiotensin II血管紧张素Ⅱ抗体
AT2R血管紧张素Ⅱ受体1抗体
Angiopoietin-1血管生成素-1抗体
Annexin V膜粘连蛋白5抗体
Annexin V重组膜粘连蛋白5抗体
alpha Adaptin衔接蛋白α-Adaptin抗体
APAF1(CT)凋亡蛋白活性因子-1抗体（C端）
APAF1(NT)凋亡蛋白活性因子-1抗体（N端）
ABCG2三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体
APOE载脂蛋白E抗体
