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上海莼试生物技术有限公司
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泛素特异性蛋白酶Otubain2抗体的生w素化标记实验要点
2023-1-10 阅读(169)
泛素特异性蛋白酶Otubain2抗体的生w素化标记实验要点:
1. 新型血小板相关内皮分泌蛋白SCUBE1抗体费用 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳suan氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析;
2.所用的NHSB及待生wu素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件;
3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活;
4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生wu素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等;
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生wu素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性;
6.生wu素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及ben酚基,也可与糖基共价结合;
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生wu素会对生wu素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用;
8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。
小鼠血管紧张素转化酶(mouse ACE)
小鼠雄激素结合蛋白(mouse ABP)
小鼠促肾上腺皮质激素(mouse ACTH)
小鼠Active Caspase-3
小鼠Active Caspase-7
小鼠Active Caspase-8
小鼠激活素A(mouse Activin A)
小鼠脂联素(mouse Adiponectin)
小鼠抗线粒体抗体(mouse AMA)
小鼠抗核抗体(mouse ANA)
小鼠血管紧张素II(mouse ANG II)
小鼠血管生成素-2(mouse Angiopoietin-2)
小鼠心钠素(mouse ANP)
小鼠凋亡诱导因子(mouse AIF)
小鼠抗利尿激素/血管加压素(mouse AVP/ADH)
小鼠醛固酮(mouse ALD)
小鼠白蛋白(mouse Albumin)
小鼠血管抑素(mouse Angiostatin)
小鼠载脂蛋白E(mouse APO E)
小鼠B淋巴细胞刺激因子(mouse BAFF)
小鼠凋亡因子BAX(mouse BAX)
小鼠细胞凋亡相关基因(mouse BCL-2)
小鼠脑衍化神经营养因子(mouse BDNF)
小鼠脑衍化神经营养因子受体(mouse BDNF R)
小鼠骨成型蛋白-2(mouse BMP-2)
小鼠骨成型蛋白-4(mouse BMP-4)
