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上海莼试生物技术有限公司
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pRB视网膜母细胞瘤抑制蛋白ELISA试剂盒操作步骤
2023-5-9 阅读(77)
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。
ARSA英文名称：芳香基硫酸酯酶1抗体
ATXN7L1英文名称：共济失调蛋白7样1抗体
AUTS2英文名称：孤独症易感基因2蛋白抗体（自闭症相关蛋白1）
ATX2英文名称：脊髓小脑共济失调2型蛋白抗体
ARSH英文名称：芳香基硫酸酯酶H抗体
ACF1英文名称：溴区结构域相邻锌指蛋白1A抗体
Apo-1英文名称：载脂蛋白1抗体
Amisyn英文名称：突触融合结合蛋白6抗体
AKD1英文名称：腺苷酸激酶结构域蛋白1抗体
ABCA7英文名称：三磷酸腺苷结合盒转运蛋白7抗体
phospho-Na+/K+-ATPase Alpha1(Ser 943)英文名称：磷酸化钠钾ATP酶α1多肽抗体
ATP1A1英文名称：Na+/K+-ATPase α1 钠钾ATP酶α1抗体
BAF53b英文名称：肌动蛋白样蛋白6B抗体
Ataxin 7英文名称：脊髓小脑共济失调蛋白7抗体
