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上海莼试生物技术有限公司
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大鼠elisa试剂盒实验中的间接法
2018-6-26 阅读(240)
大鼠elisa试剂盒自从60-70年代问世以来，得到*科研工作者的认可及推崇，在欧美及中国获得很大的推广，尤其是国内生化领域的长足发展。 Elisa试剂盒生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。
Elisa试剂盒间接法的操作步骤为以下几点：
1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；
2.次日洗涤3次；
3.加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；
4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml；
5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；
6.zui后一遍用DDW洗涤。
7.加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
8.终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
9.结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+"、“-"号表示。也可测OD值：在大鼠elisa试剂盒检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
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大鼠elisa试剂盒
