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探讨 NLRP3 在致大鼠肺纤维化中的表达及作用

2019-5-22  阅读(448)

       肺纤维化是间质性肺炎中*常见的一种,高发于老年人群,以胸膜下肺基底部分布为主,HRCT 上可表现为数量不等、范围有限的磨玻璃影及网格影[1]。近年来研究发现,肺组 织损伤可导致组织蛋白酶及 ROS 大量释放,诱导炎症小体( NLRP3) 高表达,参与慢性炎症形成。本实验采用大鼠气管滴注制作肺纤维化模型,探讨 NLRP3 在致大鼠肺纤维化中的表达及作用机制。
1资料与方法
1. 1 一般资料
健康清洁级 Wistar 大鼠 60 只( 雌雄各半) ,6 周龄,体重 180 ~ 220 g,由哈尔滨医科大学实验动物学部提供。主要试剂及仪器: HE 染色试,NLRP3大鼠 ELISA 试剂盒。
1. 2 实验方法
10% ( 3. 5 ml / kg) 腹腔注射将 Wistar 大鼠麻醉后,仰卧固定于鼠板上,剪去颈毛并消毒皮肤,无菌操作下作 长约 1 cm 的颈中切口,逐层分离暴露气管,弯眼科钳经气管下方穿过,轻抬气管,直视下用 1 ml 注射器针头穿刺两软骨环间,抬高鼠板头端,使与桌面成 30 ~ 35 度角。保持针头与气道方向一致,并尽可能在气道,B、D 组以 4 mg / kg 剂量一次性快速推注至气管,对照组给予生理盐水。立即拔出针头,保持大鼠直立体位,左右来回旋转 1 ~ 2 min,使药液尽可能到达两侧肺部并均匀分布。手术后缝合皮肤,置 于动物室喂养。D 组大鼠于肺纤维化造模基础上第 2 天每日腹腔注射 3 mg / kg,N、B 组大鼠注射生理盐水作为对照。分别于造模后第 1、7、14、28 天处死大鼠。HE 染色观察大鼠肺组织病理变化,ELISA 法检测肺组织IL - 37 水平,严格按照试剂盒说明书进行操作。
1.3 采用 SPSS22. 0 软件进行分析
实验结果采用( x珋± s) 描述,组间多重比较应用 LSD - t 检验,以 P < 0. 05 为差异有统计学意义。
2结 果
2.1 大鼠肺组织病理观察结果
N 组大鼠肺组织气道上皮光滑,无炎性细胞渗出,肺泡壁正常,无纤维化改变。B 组与 N 组相比,气管周围炎细胞浸润,肺组织大量结构破坏,肺泡间隔明显增宽,胶原纤维沉积,



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