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上海莼试生物技术有限公司
主营产品： ELISA试剂盒,ELISA试剂盒价格，ELISA试剂盒报价 |
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ELISA试剂盒技术进行定量的平台化方法
2019-9-25 阅读(233)
ELISA试剂盒定量方法的类型和构架
来用 ELISA技术进行定量的平台化方法——般来说可以分为两类,即间接法和直接法。
间接法也称为竟争法,直接法也称双抗夹心法
今天,我们重点为大家介绍直接法。
直接法以定量抗原为例
首先,以与抗原有强亲和力的抗体包被同定在酶标板材上,加入抗原标准品/样品反应,再加入与抗原有强亲和力的抗体并且偶
联了辣根过氧化氢酶HRP/碱性磷酸酶AP的酶联抗体反应,后加入酶对应的底物显色,中间通过洗涤去除反应体系中未结
的试剂成分。
这样信号大小和抗原的浓度成正相关,随着反应的进行酶标板材上定的成分由抗体,转变为抗体-抗原,后变为抗体-抗原-
酶联抗体,待测的抗原处于两个抗体之间,所以也称为双抗夹心法。
双抗夹心法有一个关键点:待检测的物质(如抗原)必须给包被抗体和酶联抗体提供两个结合位点,这两个位点可以是抗原上
两个以上相同的结构位点,也可以是不同的结构位点。
一般来说, Elisae的构架由标進品,内控品,空白对照,基质对照和待测样品组成。
内控品
其中,内控品是能够使用的、独立分装的、特定浓度(高中低)的标准品,是监控 ELISA实验在单次实验中的质量和
的应用过程中不同批次标准品的过渡桥接。
空白对
空白对照为不含标准品的标准品溶液,基质对照则为不含样品的样品溶液一一两者可能是一样的成分,也可能是不同的成分,
需要根据实验的具体情况进行区分,目的是确认 ELISA体系中是否有非特异的交又反应
