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上海莼试生物技术有限公司
主营产品： ELISA试剂盒,ELISA试剂盒价格，ELISA试剂盒报价 |
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脱落酸（ABA）含量ELISA测试盒操作流程
2020-5-7 阅读(315)
脱落酸(ABA)含量ELISA测试盒操作流程：
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
本试剂盒应用间接竞争法测定标本中脱落酸含量。用纯化的脱落酸标准品包被微孔板，制成固相抗原。样品中脱落酸与固相抗原竞争抗体，再利用HRP标记的二抗催化底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转
化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的脱落酸含量呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中脱落酸浓度。
