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猪食欲素受体(OXR)ELISA试剂盒操作步骤

2021-9-15  阅读(125)

猪食欲素受体(OXR)ELISA试剂盒操作步骤:


1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

蛋白激酶A5受体抗体
上皮钠离子通道蛋白γ/γENaC抗体
癌基因ETS2抗体
内皮素3抗体
磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体
磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体
细胞外信号调节激酶4抗体
肠出血性大肠杆菌埃希氏菌O157:H7抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶ERK抗体
CD312抗体
eIF4E结合蛋白抗体
磷酸化表皮生长因子受体抗体
磷酸化表皮生长因子受体抗体
肝配蛋白A1受体抗体
真核翻译起始因子2C2抗体
眼睛发育缺失蛋白EYA2抗体
EYA4蛋白抗体
血清反应因子辅助蛋白1抗体
吞噬细胞运动蛋白2抗体
红细胞膜条带4.1蛋白抗体
磷酸化红细胞生成素受体抗体
转录调节因子E2F7抗体
胶质细胞运载蛋白4抗体
erbB3结合蛋白1抗体
烯酰水合酶1抗体
烯酰水合酶含结构域蛋白2抗体




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