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上海莼试生物技术有限公司
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碱性蛋白酶测试盒NP酶活性计算
2021-12-1 阅读(1658)
碱性蛋白酶测试盒NP酶活性计算：
（1）按蛋白浓度计算 NP活性单位（U）定义：30℃每毫克蛋白每分钟水解产生1μmol为一个酶活单位。NP活性（U/mgprot）=C标准品×△A测定÷△A标准×V1÷（Cpr×V2）÷T =0.125×△A测定÷△A标准÷Cpr
（2）按样本鲜重计算 NP活性单位（U）定义：30℃每克样品每分钟催化水解产生1μmol为一个酶活单位。NP活性（U/g鲜重）=C标准品×△A测定÷△A标准×V1÷（W×V2÷V3）÷T =0.125×△A测定÷△A标准÷WC标准品：标准溶液浓度，0.25μmol/mL；Cpr：粗酶液蛋白质浓度，mg/mL；W：样品鲜重，g； V1：酶促反应总体积，0.1mL；V2：加入反应体系中粗酶液体积，20µL=2×10-2mL；V3：粗酶液总体积，1mL； T：催化反应时间，10min。 注意：若反应较弱，（A测定管－A对照管）差值较小，可适当延长反应时间（20-30min），即步水浴时间，最后计算酶活时对公式进行修改。
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