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上海莼试生物技术有限公司
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矢车菊素-O-半乳糖苷含量测试盒操作步骤
2022-1-18 阅读(112)
矢车菊素-O-半乳糖苷含量测试盒操作步骤(仅供参考)：
1.配制65mM H2O2基液：本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定，使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍，使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品：
a,细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行裂解，可以采用Leagene Western及IP细胞裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-70℃冻存，用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，用生理盐水10倍稀释后， 可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-70℃冻存，用于CAT的检测。
c,全血样品：收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内，颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次，用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液：用抗凝管收集血液，颠倒混匀。取至少500μl全血4℃3000g离心5min，弃上清，沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品：如果样品中含有较高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、CAT检测：按照下表设置空白管、自身对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度，分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计，亦可用酶标仪检测，但如果有条件，尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零，读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
ASBT顶膜钠依赖性胆盐转运体蛋白抗体
ADAM8去整合素样金属蛋白酶8抗体
AADACL3芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3抗体
ACN9ACN9蛋白抗体
ADAR1 (N-terminus)双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体（N端）
AMPK alpha 2腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体
ADK腺苷酸激酶抗体
A2ML1α2巨球蛋白样蛋白1抗体 α2ML1
3-Apr细胞凋亡相关蛋白3抗体
Actin肌动蛋白α/α-SMA/α Actin抗体
ABCB7ATP结合蛋白家族7抗体
ASCL2ASCL2蛋白抗体
phospho-Ataxin 1(Ser775)磷酸化脊髓小脑失调症蛋白1抗体
phospho-ATF1 (Ser63)磷酸化活化转录因子1抗体
phospho-ATF2 (Ser480)磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2 (Thr51 + Thr53)磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2 (Thr69 + Thr51)磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2 (Thr73 + Thr55)磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2 (Thr71 + Thr53)磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2(Thr71)磷酸化活化复制因子2抗体
ATF5活化转录因子5抗体
ATF6 beta活化转录因子6β抗体
ATICAICAR甲酰基转移酶抗体
phospho-ATM (Ser794)磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体
ATP5EATP5E蛋白抗体
