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上海莼试生物技术有限公司
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鱼甲状腺素（T4）酶联免疫分析试剂盒技术参数
2018-3-6 阅读(131)
| 提 供 商 | 上海莼试生物技术有限公司 | 资料大小 | 140.1KB |
|---|---|---|---|
| 资料图片 | 下载次数 | 19次 | |
| 资料类型 | JPG 图片 | 浏览次数 | 131次 |
鱼甲状腺素(T4)酶联免疫分析试剂盒使用目的：
本试剂盒用于测定鱼血清、血浆及相关液体样本中甲状腺素(T4)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼甲状腺素(T4)水平。用纯化的鱼甲状腺素(T4)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入甲状腺素 (T4)，再与 HRP标记的甲状腺素 (T4)抗体结合，形成抗体 -抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的甲状腺素(T4)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鱼甲状腺素(T4)浓度。
鱼甲状腺素(T4)酶联免疫分析试剂盒操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl，待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl（样品zui终稀释度为 5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
4.配液：将 30倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30秒后弃去，如此重复 5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后 15分钟以内进行。
鱼甲状腺素(T4)酶联免疫分析试剂盒注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在 5分钟内，如标本数量多，使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD值大于标准品孔*孔的 OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
鱼甲状腺素(T4)酶联免疫分析试剂盒保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月
