英文简称：NCI-H774细胞    

产品名称：小细胞肺癌

规格：T25

形态特性：

生长特性：悬浮生长

特征特性：

培养条件：HITES medium supplemented with 5% fetal bovine serum

The base medium for this CA-ll line is ATCCS-formulated DMEM:F12 Medium Catalog No.30-2006. To make the complete growth medium,add the following components to the base medium 0.005 mg/ml Insulin 0.01 mg/ml Transferrin 30nM Sodium selenite (final conc.) 10 nM Hydrocortisone (final conc.) 10 nM beta-estradiol (final conc.) extra 2mM L-glutamine (for final conc. of 4.5 mM) 5% fetal bovine serum (final conc.)

传代方法：每周换液2次。

货号：CS-X63789
公司产品仅用于科研公司有大量的优质细胞，还提供细胞的全程后期服务，可以向专业人士咨询详细的细胞培养条件，冻存方法，及相关培养技术。

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

细胞培养操作规范：

主要功能：
（1）血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
（2）表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1，参与血管壁的炎症反应。
（3）与血管疾病的进展和稳定有关。
生理变化：
（1）主动脉硬化。
（2）主动脉瘤
（3）主动脉钙化。
基本特性：
（1）组织来源于正常大鼠大动脉组织。
（2）鉴定：肌动蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
（3）原代细胞培养末期液氮冻存。
（4）每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。
（5）肌动蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

匍枝根霉拉丁属名: Staphylococcus saprophyticus

腐生葡萄球菌拉丁属名: Absidia cristata

冠毛犁头霉注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用

粉红聚端孢拉丁属名: novyi

诺维氏梭菌拉丁属名: Aspergillus  foetidus

臭曲霉拉丁属名: Phytophthora cactorum

恶疫霉*拉丁属名: Aspergillus sepultus

埋藏曲霉拉丁属名: Candida tropicalis

热带假丝酵母拉丁属名: Bacillus  thuringiensis

苏云金芽孢杆菌拉丁属名: Mucor exponens

展示接霉拉丁属名: Fusarium incarnatum (Desm.) Sacc.

半裸镰孢菌拉丁属名: Streptomyces afhhaniensis

阿富汗链霉菌拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

酿酒酵母拉丁属名: Candida tropicalis

热带假丝酵母拉丁属名: Beauveria bassiana

球孢白僵菌拉丁属名: Candida  boidinii
NCI-H774细胞珠蛋白转录因子1抗体乙素（标准品） Vanadium solution

过氧化酶3类叶升麻苷,毛蕊花糖苷（标准品） Yttrium standard

过氧化酶4抗体藜芦 Zinc standard

高尔体膜蛋白GP73抗体里卡灵A Zinc standard

G蛋白偶联受体172B抗体利卡灵-B;利卡灵B  Vamidothion standard solution

生发中心B淋巴相关蛋白2抗体(标准品) Vacuum pump oil

G蛋白转录因子α3抗体栎樱(标准品) Vacuum pump oil

G蛋白偶联受体124抗体（肿瘤血管内皮标记物）连钱草（标准品） Vacuum pump oil

半乳糖凝集素1抗体连翘（标准品） Vacuum pump oil
操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜，co2孵箱。
1.2 细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率指数生的细胞，以0.25％消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线。