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参数规格：
产品名称：蓝舌病病毒(BTV)定性PCR检测试剂盒
产品货号：CP100134
产品规格：50T
产品分类：RT-PCR法
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
使用方法：
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意：DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA，后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线（以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或超纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL，建议每次稀释10倍，梯度稀释至10E7拷贝/μL）。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头，从6号管中取5 μL溶液到5号管中，充分震荡1分钟，得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头，从5号管中取5 μL溶液到4号管中，重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR（见下步），每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
杨奇青霉1号染色体开放阅读框84抗体Human NPYR5(Neuropeptide Y Receptor Y5) ELISA Kit人肾上腺髓质素(ADM)免疫试剂盒

沙诺氏芽孢杆菌E3泛素蛋白连接酶CHIP蛋白抗体Human NRG-3(Neuregulin 3) ELISA Kit人肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)免疫试剂盒

幼角镰孢肉碱O-乙酰基转移酶Human OVA sIgE(Ovalbumin Specific IgE) ELISA Kit人肾上腺素(EPI)免疫试剂盒

黑色附球霉5号染色体开放阅读框45抗体Human OVA sIgG(Ovalbumin Specific IgG) ELISA Kit人肾上腺皮质抗体(ACA)免疫试剂盒

大肠埃希菌5号染色体开放阅读框48抗体Human OXA(Orexin A) ELISA Kit人蛋白(nephrin)免疫试剂盒

雅致枝霉6号染色体开放阅读框136抗体Human NRG-4(Neuregulin 4) ELISA Kit人肾酶(RNLS/MAO-C)免疫试剂盒

棒杆菌6号染色体开放阅读框138抗体Human PCIII(Procollagen III) ELISA Kit人神经轴突丝蛋白(NAFP)自身抗体免疫试剂盒

季也蒙迈耶氏酵母6号染色体开放阅读框145抗体Human PCI(Protein C Inhibitor) ELISA Kit人神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)免疫试剂盒

大孔菌CD39抗体Human PDIA5(Protein Disulfide Isomerase A5) ELISA Kit人神经营养因子3(NT-3)免疫试剂盒

嗜麦芽寡养单胞菌6号染色体开放阅读框106抗体Human PDIA6(Protein Disulfide Isomerase A6) ELISA Kit人神经型一氧化氮合成酶(nNOS)免疫试剂盒

黄色糖多孢菌6号染色体开放阅读框115抗体Human PDK4(Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit人神经粘着分子(NRCAM)免疫试剂盒

居真菌细菌属6号染色体开放阅读框123抗体Human PCNA(ProlifeRating Cell Nuclear Antigen) ELISA Kit人神经粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)免疫试剂盒

少根根霉6号染色体开放阅读框129抗体Human PDP(Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase) ELISA Kit人神经特异性烯化酶(NSE)免疫试剂盒

纤维单胞菌6号染色体开放阅读框129抗体Human NT-ProANP(N-Terminal Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit人神经肽Nesfatin-1 免疫试剂盒

金黄杆菌6号染色体开放阅读框132抗体Human PEX2(Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit人神经丝蛋白M(NF-M)免疫试剂盒

孔状短小茎点霉磷酸化钙调磷酸酶B亚基B1抗体Human PCPE1(Procollagen C Proteinase Enhancer 1) ELISA Kit人神经丝蛋白L(NF-L)免疫试剂盒
蓝舌病病毒(BTV)定性PCR检测试剂盒除烃海杆状菌Marinobacter│hydrocarbonoclasticus 质量规格：HPLC≥98%，标准品骨保护素试剂盒D-棉籽糖;纯品型;标准品;有证书

根霉Rhizopus│sp. 质量规格：HPLC≥98%，标准品硫转移酶pi基因试剂盒L-;纯品型;标准品;有证书

坚强芽孢杆菌Bacillus│firmus Bredemann and Werner 质量规格：>98%,BR还原酶试剂盒;纯品型;标准品;有证书

泡盛曲霉Aspergillus│awamori 质量规格：HPLC≥99%，标准品过氧化酶试剂盒低聚果糖-蔗果五糖;纯品型;标准品;有证

桔灰青霉Penicillium│aurantiogriseum 质量规格：>98%,BRS转移酶TT试剂盒低聚果糖-蔗果四糖;纯品型;标准品;有证

副猪嗜血杆菌Haemophilus│parasuis 质量规格：HPLC>98%,S构型，标准品试剂盒低聚果糖-蔗果三糖;纯品型;标准品;有证

金黄色葡萄球菌Staphylococcus│aureus 质量规格：HPLC≥98%，标准品谷氨酰转移酶6抗体试剂盒D-麦芽糖;纯品型;标准品;有证书

产气荚膜梭菌 毒素D型Clostridium│perfringens Type D 质量规格：HPLC≥98%，标准品谷氨酰转移酶2抗体试剂盒柠檬酸;纯品型;标准品;有证书

海神弧菌Vibrio│neptunius 质量规格：HPLC≥98%，标准品谷氨酰转移酶2抗体试剂盒L-;纯品型;标准品;有证书