上海莼试生物技术有限公司
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更新时间:2021-12-28 17:07:42浏览次数:429
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公司是*的ATCC细胞供应商,提供绿色荧光蛋白标记小鼠前胃癌细胞;MFC-GFP
的报价,咨询,称技术服务,咨询选购。
细胞名称 绿色荧光蛋白标记小鼠前胃癌细胞;MFC-GFP
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 转染pEGFP-N1,稳定表达绿色荧光蛋白。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;G418 200ug/ml
传代方法 1:3传代;2~3天1次。
传代情况 P5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
培养需要满足以下条件
1、无菌、无毒的环境:首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境,即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。
2、营养物质:细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。
3、温度和pH:细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近。多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。
4、气体环境:培养所需气体主要有O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
factor, EG-VEGF Elisa Kit 96T/48T
人睫状神经营养因子(CNTF)elisa试剂盒 Human Ciliary Neurotrophic Factor, CNTF Elisa Kit 96T/48T
人CD30分子(CD30)elisa试剂盒 Human Cluster of differentiation 30, CD30 Elisa Kit 96T/48T
人CXC趋化因子受体1(CXCR1)elisa试剂盒 Human CXC-chemokine receptor 1, CXCR1 Elisa Kit 96T/48T
人XC趋化因子受体1(XCR1)elisa试剂盒 Human XC-chemokine receptor 1, XCR1 Elisa Kit 96T/48T
人二级淋巴组织趋化因子(SLC/CCL21)elisa试剂盒 Human secondary lymphoid-tissue chemokine, SLC Elisa Kit 96T/48T
人E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)elisa试剂盒 Human E-Cadherin, E-Cad Elisa Kit 96T/48T
人脑源性神经营养因子(BDNF)elisa试剂盒 Human Brain derived neurotrophic facor, BDNF Elisa Kit 96T/48T
人白细胞活化黏附因子(ALCAM)elisa试剂盒 Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule, ALCAM Elisa Kit 96T/48T
人活化素A(ACV-A)elisa试剂盒 Human Activin A, ACV-A Elisa Kit 96T/48T
人神经调节蛋白1(NRG-1)elisa试剂盒 human Neuregulin 1, NRG-1 Elisa Kit 96T/48T
人心钠肽(ANP)elisa试剂盒 Human Atrial Natriuretic Peptide, ANP Elisa Kit 96T/48T
人多巴胺D2受体(D2R)elisa试剂盒 Human dopamine D2 receptor, D2R Elisa Kit 96T/48T
人内*肽-2(EM-2)elisa试剂盒 Human endomorphin-2, EM-2 Elisa Kit 96T/48T
人α-内*肽(α-EP)elisa试剂盒 Human α-Endomorphin, α-EP Elisa Kit 96T/48T
人抑制素(INH)elisa试剂盒 Human Inhibin, INH Elisa Kit 96T/48T
人神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)elisa试剂盒 Human neuronal apoptosis inhibitory protein, NAIP Elisa Kit 96T/48T
人食欲素/阿立新B(OX-B)elisa试剂盒 Human Orexin B, OX-B Elisa Kit 96T/48T
人促睡眠肽(DSIP)elisa试剂盒 Human delta sleep-inducing peptide, DSIP Elisa Kit 96T/48T
人6-羟多巴胺(6-OHDA)elisa试剂盒 Human 6-hydroxydopamine, 6-OHDA Elisa Kit 96T/48T
人心纳素(ANF)elisa试剂盒 Human atrial natriuretic factor, ANF Elisa Kit 96T/48T
人神经髓鞘蛋白(p2)elisa试剂盒 Human myelin protein 2, p2 Elisa Kit 96T/48T
人*加压素(AVP)elisa试剂盒 Human arginine vasopressin, AVP Elisa Kit 96T/48T
人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)elisa试剂盒 Human pituitary adenylate cyclase activating polypeptide, PACAP Elisa Kit 96T/48T
人微管相关蛋白2(MAP-2)elisa试剂盒 Human microtubule-associated protein 2, MAP-2 Elisa Kit 96T/48T
人神经丝蛋白(NF)elisa试剂盒 Human neurofilament protein, NF Elisa Kit 96T/48T
人利钾尿肽(KP)elisa试剂盒 Human kaliuretic peptide, KP Elisa Kit 96T/48T
人神经降压素(NT)elisa试剂盒 Human Neurotensin, NT Elisa Kit 96T/48T