原代细胞培养的具体步骤：

1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。

3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分钟。

5、消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。

6、分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500-1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。

7、计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2-7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。

8、培养：置于37℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。

大鼠视网膜前体细胞

商品属性：

细胞简介：

大鼠视网膜前体分离自视网膜组织；视网膜居于眼球壁的内层，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成，两层间在病理情况下可分开，称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连，由色素上皮细胞组成，它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层，由外向内分别为：色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜，有感光作用；后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。第一神经元是视细胞层，专司感光，它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上，而视锥细胞则在中心凹处最多。第二层叫双节细胞，约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系，负责联络作用。第三层叫节细胞层，专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构，它贴于眼球的后壁部，传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面，经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的，在黄斑区，其分辨能力。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠视网膜前体经Nestin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠视网膜前体采用消化法结合专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

培养信息：

培养基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 半贴半悬浮

细胞形态 圆形

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

原代细胞VS细胞系：

用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞。严格来说，从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞，绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关)，再加上取材，成本等因素，通常会把培养的第一代到第十代以内的细胞统称为原代细胞。

原代细胞一般传至10代左右，大部分细胞衰老死亡，但是有极少数的细胞能够度过“危机"而继续传下去，存活的细胞一般能够传到40-50代，叫细胞株。当50代以后又会出现“危机"，这时有部分细胞的遗传物质发生了改变且带有癌变的特点，从而可能无限制地传代下去，称为细胞系。

也有认为细胞系指原代细胞培养物经传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。由此便引申出了后来的有限细胞系、无限细胞系，因此，细胞系狭义的是指可连续传代的细胞，广义是指可传代的细胞。而细胞株是通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的单一细胞称为细胞株。

细胞系具有容易培养、种类多、价格便宜、无限传代等优点，也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。

公司正在销售的产品：

猪伪狂犬病毒(PRV/PFV)ELISA试剂盒 96T/48T

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病毒抗体elisa试剂盒   病毒抗体试剂盒   规格型号：96T/48T   病毒抗体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：病毒抗体试剂盒、病毒抗体eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

猪伪狂犬病抗体elisa试剂盒   猪伪狂犬病抗体试剂盒   规格型号：96T/48T   猪伪狂犬病抗体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪伪狂犬病抗体试剂盒、猪伪狂犬病抗体eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

猪褪黑素elisa试剂盒   猪褪黑素试剂盒   规格型号：96T/48T   猪褪黑素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪褪黑素试剂盒、猪褪黑素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

大鼠白介素18(IL-18)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-18 ELISA Kit

Rabbit maix metalloproteinase 9 (MMP-9) ELISA Kit 兔子基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒

ELISA 小鼠白介素-27(mouse IL-27) 48T/96T 进口分装

CLIAKitforIL-2sRBeta(HumanIerleukin2)ELISAkit人白介素2可溶性受体β链规格：48T/96T

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