原代细胞VS细胞系：

用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞。严格来说，从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞，绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关)，再加上取材，成本等因素，通常会把培养的第一代到第十代以内的细胞统称为原代细胞。

人肝内胆管上皮细胞

商品属性：

细胞简介：

人肝内胆管上皮分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。通过控制激素调控的分泌和吸收，在保持、调整和扩大胆小管的结构中发挥重要作用，肝内胆管上皮细胞在先天性和获得性免疫应答方面起着积极作用。肝内胆管上皮细胞约占肝细胞总数的5%，其在肝内胆道系统内形成复杂的网状管形结构。肝内胆管上皮细胞具有复杂的生理代谢功能，参与肝脏的代谢、排泌、免疫等生理过程，在肝脏疾病的发生发展过程中起一定的作用。研究表明，常见的肝内胆管病变例如原发性硬化性胆管炎、胆管癌等疾病，都是以肝内胆管上皮细胞为病变靶位，进而引起肝内胆管上皮损伤。因此，了解正常肝内胆管上皮细胞的生物学特征和病变肝内胆管上皮细胞的病理特征对研究肝内胆管病变的发病机制、诊断和治疗具有重要意义。

方法简介：

公司实验室分离的人肝内胆管上皮经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

质量检测：

公司实验室分离的人肝内胆管上皮采用胶原酶灌注消化法后，再用胶原酶-DNA酶联合消化，接种至预先包被鼠尾胶原的培养瓶中，通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

原代细胞一般传至10代左右，大部分细胞衰老死亡，但是有极少数的细胞能够度过“危机"而继续传下去，存活的细胞一般能够传到40-50代，叫细胞株。当50代以后又会出现“危机"，这时有部分细胞的遗传物质发生了改变且带有癌变的特点，从而可能无限制地传代下去，称为细胞系。

也有认为细胞系指原代细胞培养物经传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。由此便引申出了后来的有限细胞系、无限细胞系，因此，细胞系狭义的是指可连续传代的细胞，广义是指可传代的细胞。而细胞株是通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的单一细胞称为细胞株。

细胞系具有容易培养、种类多、价格便宜、无限传代等优点，也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。

公司正在销售的产品：

小鼠载脂蛋白E(Apo-E)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human perinuclear ai neuophil cytoplasmic aibody (pANCA) ELISA Kit 人抗粒细胞核周抗体(pANCA)ELISA试剂盒

Humanmelatoninsulfate,MSELISAKit 人硫酸褪黑色素(MS)ELISA试剂盒 96T/48T 分装

CLIAKitforABeta1-40(Mouseamyloidbetapeptide1-40)ELISAKit小鼠β淀粉样蛋白规格：48T/96T

乙肝病毒DNA化试剂盒20次

MouseMyoglobin,MYO/MBELISAKit小鼠肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

血浆游离基因组DNA提取试剂盒   Plasma free genomic DNA Exaction Kit

M13单链基因组DNA快速提取试剂盒   Rapid exaction kit for M13 phage single chain genomic DNA

λ基因组DNA快速提取试剂盒   Fast exaction kit for phage genomic DNA

超土壤基因组DNA快速提取试剂盒   Rapid exaction kit for genomic DNA in soil

大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA试剂盒 ，英文名： PKB ELISA Kit

Porcine serum niic oxide (NO) ELISA Kit 猪血清(NO)ELISA试剂盒

ELISA 小鼠血管紧张素转化酶(mouse ACE) 48T/96T 分装

CLIAKitforLp-PL-A2ELISAKit大鼠脂蛋脂酶A2规格：48T/96T

通用细胞HRP酶联检测封闭溶液100毫升

ELISAKitFSH鸡促卵泡素规格：48T/96T

LILRB3重组小鼠 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 (His 标签) Protein

白介素7(IL7)重组蛋白 Recombinant Interleukin 7 (IL7)

GUCA1A重组人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白 (His & GST 标签) Protein

CCL17 Protein Human 重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 标签)

IL2RA Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL2RA 蛋白 (Fc 标签)

人肝内胆管上皮细胞ANPEN/CD13(Aminopeptidase N 0.5mgANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽酶N抗原

CCL17 Protein Human 重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 标签)

F11R重组小鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签) Protein

CD68 Protein Rat 重组大鼠 CD68 / Macrosialin 蛋白 (His 标签)

PA2G4重组人 EBP1 / PA2G4 蛋白 (His 标签) Protein

原代细胞培养的具体步骤：

1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。

3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分钟。

5、消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。

6、分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500-1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。

7、计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2-7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。

8、培养：置于37℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。