原代细胞VS细胞系：

用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞。严格来说，从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞，绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关)，再加上取材，成本等因素，通常会把培养的第一代到第十代以内的细胞统称为原代细胞。

人冠状动脉平滑肌细胞

商品属性：

细胞简介：

人冠状动脉平滑肌分离自冠状动脉组织；冠状动脉是供给心脏血液的动脉，起于主动脉根部，分左右两支，行于心脏表面。采用Schlesinger等的分类原则，将冠状动脉的分布分为三型：右优势型、均衡型、左优势型。左右冠状动脉是升主动脉的第一对分支。左冠状动脉为一短干，发自左主动脉窦，经肺动脉起始部和左心耳之间，沿冠状沟向左前方行后，立即分为前室间支和旋支。前室间支沿前室间沟下行，旋支绕过心尖切迹至心的膈面与右冠状动脉的后室间支相吻合。它是构成冠状动脉壁的主要细胞成分，细胞膜上分布着多种离子通道，如电压依赖性Na+通道、多种Ca2+通道和K+通道；它们参与了静息电位的维持与细胞膜电位的复极化、超极化，调节血管平滑肌的收缩及舒张功能，此外动脉粥样硬化的发展也涉及冠状动脉平滑肌细胞增殖、炎症及凋亡等。因此，原代分离培养的冠状动脉平滑肌细胞，对研究生理和病理状态下离子通道及血管张力变化机制具有非常重要的作用。冠状动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

方法简介：

公司实验室分离的人冠状动脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

质量检测：

公司实验室分离的人冠状动脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

原代细胞一般传至10代左右，大部分细胞衰老死亡，但是有极少数的细胞能够度过“危机"而继续传下去，存活的细胞一般能够传到40-50代，叫细胞株。当50代以后又会出现“危机"，这时有部分细胞的遗传物质发生了改变且带有癌变的特点，从而可能无限制地传代下去，称为细胞系。

也有认为细胞系指原代细胞培养物经传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。由此便引申出了后来的有限细胞系、无限细胞系，因此，细胞系狭义的是指可连续传代的细胞，广义是指可传代的细胞。而细胞株是通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的单一细胞称为细胞株。

细胞系具有容易培养、种类多、价格便宜、无限传代等优点，也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。

公司正在销售的产品：

小鼠乙型肝炎核心抗体(HBcAb)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human soluble P selectin (sP-selectin) ELISA Kit 人可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒

Humancytokeratin19,CK-19ELISAKit 人细胞角蛋白19(CK-19)ELISA试剂盒 96T/48T 分装

CLIAKitfor6-keto-PGF1a(Human6-keto-prostaglandinF1a)ELISAKit人6同前列腺素F1a规格：48T/96T

饮料D-葡萄糖酸盐比色法定量检测试剂盒20次

Mousemajorhistocompatibilitycomplex-Ⅲ,MHC-Ⅲ/H-2ⅢELISAKit小鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

血管紧张素Ⅱ一型受体抗原   英文名称：   Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen   英文缩写：   AT1R   规格：   48T/96T

抗血管紧张素‖受体︱型自身抗体   英文名称：    Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies   英文缩写：   AT1R-AA   规格：   48T/96T

血管紧张素Ⅰ   英文名称：   AngiotensinⅠ   英文缩写：   ANGⅠ   规格：   48T/96T

血管紧张素Ⅱ   英文名称：   Angiotensin Ⅱ   英文缩写：   ANGⅡ   规格：   48T/96T

大鼠分泌型0脂酶A2(sPLA2)ELISA试剂盒 ，英文名： sPLA2 ELISA Kit

Porcine maix metalloproteinase 9 (MMP-9) ELISA Kit 猪基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒

转基因植物Sad1基因核酸检测试剂盒 48T

CLIAKitforMBLR(HumanMannmabindinglectieceptor)ELISAKit人甘露糖凝集素受体规格：48T/96T

体液氧化应激活性氧(ROS)比色法定量检测试剂盒(羟自由基)20次

ELISAKitAFP裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白规格：48T/96T

CD28重组小鼠 CD28 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

CGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP 0.5mgCGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP) 降钙素基因相关肽

CMBL重组人 CMBL 蛋白 (His 标签) Protein

CCL7 Protein Human 重组人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 标签)

MBL1 Protein Mouse 重组小鼠 MBL1 蛋白 (His 标签)

人冠状动脉平滑肌细胞IgG-Fc片段低亲和力受体Ⅲb(FcγR3B)重组蛋白 Recombinant Fc Fragment Of IgG Low Affinity IIIb Receptor (FcgR3B)

CCL7 Protein Human 重组人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 标签)

IL12A & IL12B重组小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

HAVCR1 Protein Rat 重组大鼠 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 (His 标签)

PDIA4重组人 ERP72 / PDIA4 蛋白 (His 标签) Protein

原代细胞培养的具体步骤：

1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。

3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分钟。

5、消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。

6、分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500-1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。

7、计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2-7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。

8、培养：置于37℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。