原代细胞VS细胞系：

用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞。严格来说，从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞，绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关)，再加上取材，成本等因素，通常会把培养的第一代到第十代以内的细胞统称为原代细胞。

人胃癌组织源成纤维细胞

商品属性：

细胞简介：

人胃癌组织源成纤维分离自胃癌组织；胃癌（gastric carcinoma）是起源于胃黏膜上皮的恶性肿瘤，在我国各种恶性肿瘤中发病率居，胃癌发病有明显的地域性差别，在我国的西北与东部沿海地区胃癌发病率比南方地区明显为高。好发年龄在50岁以上，男女发病率之比为2:1。由于饮食结构的改变、工作压力增大以及幽门螺杆菌的感染等原因，使得胃癌呈现年轻化倾向。胃癌可发生于胃的任何部位，其中半数以上发生于胃窦部，胃大弯、胃小弯及前后壁均可受累。绝大多数胃癌属于腺癌，早期无明显症状，或出现上腹不适、嗳气等非特异性症状，常与胃炎、胃溃疡等胃慢性疾病症状相似，易被忽略，因此，目前我国胃癌的早期诊断率仍较低。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

方法简介：

公司实验室分离的人胃癌组织源成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

质量检测：

公司实验室分离的人胃癌组织源成纤维采用-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

原代细胞一般传至10代左右，大部分细胞衰老死亡，但是有极少数的细胞能够度过“危机"而继续传下去，存活的细胞一般能够传到40-50代，叫细胞株。当50代以后又会出现“危机"，这时有部分细胞的遗传物质发生了改变且带有癌变的特点，从而可能无限制地传代下去，称为细胞系。

也有认为细胞系指原代细胞培养物经传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。由此便引申出了后来的有限细胞系、无限细胞系，因此，细胞系狭义的是指可连续传代的细胞，广义是指可传代的细胞。而细胞株是通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的单一细胞称为细胞株。

细胞系具有容易培养、种类多、价格便宜、无限传代等优点，也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。

公司正在销售的产品：

小鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human lymphocyte function associated aigen 1 (LFA-1/CD11a+CD18) ELISA Kit 人淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1/CD11a+CD18)ELISA试剂盒

Humanglucoseoxidase,GODELISAKit 人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenImmuneRNA,IrnaELISA试剂盒鸡免疫核糖核酸(Irna)ELISA试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞COLLAGENI蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

MouseHeatShockFactor1,HSF1ELISAKit小鼠热休克因子1(HSF1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

小鼠活化调节趋化因子(mouse TARC)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

小鼠抗复合物(mouse TAT)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

小鼠组织因子(mouse TF)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

小鼠组织因子抑制物(mouse TFPI)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

大鼠Ⅰ型前胶原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA试剂盒 ，英文名： PⅠCP ELISA Kit

People sleep inducing peptide (DSIP) ELISA Kit 人促睡眠肽(DSIP)ELISA试剂盒

Caninethrombusprecursorprotein,TpPELISAKit 犬血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforCICP(Humancross-linkedC-telopeptidesofTypeIcollagen)ELISAKit人Ⅰ型前胶原C末端肽规格：48T/96T

细菌活力蓝色荧光(DAPI)检测试剂盒50次

Rabbietinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit兔子结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

ERBB2重组大鼠 HER2 / ErbB2 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签) Protein

HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1 0.5mgHO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1) 血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗原

SIRT1重组人 SIRT1 / SIR2L1 蛋白 (His 标签) Protein

CDCP1 Protein Human 重组人 CDCP1 / CD318 蛋白 (Fc 标签)

TNFRSF9 Protein Mouse 重组小鼠 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (Fc 标签)

人胃癌组织源成纤维细胞HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1 0.5mgHO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1) 血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗原

CDCP1 Protein Human 重组人 CDCP1 / CD318 蛋白 (Fc 标签)

ERBB2重组大鼠 HER2 / ErbB2 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签) Protein

TNFRSF9 Protein Mouse 重组小鼠 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (Fc 标签)

SIRT1重组人 SIRT1 / SIR2L1 蛋白 (His 标签) Protein

原代细胞培养的具体步骤：

1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。

3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分钟。

5、消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。

6、分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500-1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。

7、计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2-7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。

8、培养：置于37℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。