2 x Taq PCR Master Mix是即用型的常规PCR预混合溶液，含有Taq DNA Polymerase、dNTP混合物、 MgCl2以及优化的缓冲体系，它以2×的浓度形式存在，反应时只需加入所需引物和模板，用水稀释即可立刻配制完PCR体系，大大地简化了操作过程，减少了PCR操作过程中的污染。本产品中含有PCR产物具有3’-dA突出端，可轻松克隆至T载体。

详细介绍

2 x Taq PCR Master Mix

产品名称	货号	规格	保存	价格(元)
2 x Taq PCR Master Mix	D1101L1146	1 mL	-20℃	200

产品简介

2 × Taq PCR Master Mix是即用型的常规PCR预混合溶液，含有Taq DNA Polymerase、dNTP混合物、MgCl2以及优化的缓冲体系，它以2×的浓度形式存在，反应时只需加入所需引物和模板，用水稀释即可立刻配制完PCR体系。本产品中含有PCR产物具有3’-dA突出端，可轻松克隆至T载体。

运输与保存方法
冰袋运输。收到产品后放到-20 ºC保存，有效期12月以上。

使用方法

1. 反应体系配制（50μl）：

模板DNA	optional
引物1（10 μM）	2 μL
引物2（10 μM）	2 μL
2× PCR Master Mix (With Dye)	25μL
ddH2O	up to 50μL

注：针对不同模板的反应浓度有所不同，下表为50μl反应体系*模板使用量，仅供参考。

人基因组DNA	0.1～1 μg
大肠杆菌基因组DNA	10～100 ng
λDNA	0.5～5 ng
质粒DNA	0.1～10 ng

2. PCR循环反应条件

94℃	5 min（预变性）
94℃	30 sec	35个循环
55℃*	30 sec
72℃	30 sec
72℃	7 min（*延伸）

注：退火温度需要根据引物的Tm值调整，一般设置成低于引物Tm值1-2℃即可。

注意事项
1.由于Taq DNA Polymerase室温下也有一定的反应活性，PCR反应体系配制需在冰上进行。体系混匀后快速置于PCR仪进行反应。这样可以减少反应准备阶段的非特异扩增，有助于得到更好的PCR结果。
2. 引物设计注意事项
2.1 引物3’端zui后一个碱基选择C或G，端zui后8个碱基应避免出现连续错配；端尽量避免发卡结构的出现；
2.2 引物Tm值控制在55℃-65℃之间；
2.3 引物额外附加序列，即与模板非配对序列，不应参与引物Tm值计算；
2.4 引物GC含量控制在40%-60%之间；
2.5 正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能*。

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