HotStart Taq DNA聚合酶
产品名称 | 货号 | 规格 | 保存 | 价格(元) |
HotStart Taq DNA聚合酶 | D1010L1181 | 50μL | -20 ℃ | 395 |
产品描述
本制品是Taq经特殊工艺处理后的制品，经处理后的Taq酶在加热至高温前，其聚合酶活性被抑制，从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。本制品适用于高特异性PCR反应、Multiplex PCR、高GC含量（>60%），有二级结构等有较强背景的基因组扩增和大规模基因组扩增检测。
本产品经多次柱纯化，SDS-PAGE检测仅见清晰单一条带，PCR检测无大肠杆菌DNA残留，未发现核酸内、外切酶活性。
活性定义
热激活后，在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTPs的掺入反应为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位(1U)。
产品特点
简便：无需改变常规热启动酶PCR程序，可在所有正常PCR程序中实现热启动PCR的效果。
高效：有效减少了杂带及拖带产生，从而实现高特异性的PCR。
灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
产品用途
高特异性PCR反应；复杂模板扩增；Multiplex PCR；基因组扩增检测；
使用建议
使用本试剂扩增得到的PCR产物3´ 端有一突出"A"碱基，可直接克隆于T-vector中。Mg2+浓度过高会产生非特异性条带，但是如果做SYBRGreen荧光定量时，需增加0.5-2mM Mg2+
产品组份
组分 | D1010L1181 | D1010L1182 |
Hot Start Taq(5U/μL) | 50 μL | 5 x 50 μL |
dNTPs混合液(各10mM) | 200 μL | 1 mL |
5× HS Taq Buffer with Mg2+ | 2 x 1 mL | 10 x 1 mL |
运输和储存
-20℃运输和保存，避免反复冻融，在保存条件下可保存1年。
使用方法
常用反应体系 | 常用PCR程序 |
5 x HS Taq Buffer with Mg2+ 上游引物 下游引物 dNTPs(个10mM) 模板
ddH2O | 10μL 0.2-1.0μM(终浓度) 0.2-1.0μM(终浓度) 1μL 1-50ng 10ng-1μg 0.25μL(1.25U) 至50μL | 扩增片段<3k 94℃ 5分钟 94℃ 5s 30次循环 57℃ 20s 72℃ 60s/kb 72℃ 5分钟 4℃ 保温 | 扩增片段≥3k 94℃ 30次循环 72℃ 4℃ | 5分钟 94℃ 5s 68℃ 60s/kb 5分钟 保温 |
注意事项
1. 体系中加入的*的酶量，可用于大多数PCR扩增，对于某些PCR，若想得到的扩增效果，可以适当添加酶量。
2. 体系中Mg2+量（2mM）可满足大部分PCR扩增，对于特殊PCR反应，可根据需要调整为2-4mM。
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