上海邦景实业有限公司

主营产品: 进口elisa试剂盒,细胞株,细胞系,菌种

8

联系电话

15000017673

您现在的位置: 首页> 技术文章 > 血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒常用的测定方法

ATCC细胞

elisa酶联免疫试剂盒

菌种

生化试剂

培养基

抗体

血清

标准品

PCR检测试剂盒

ELISA试剂盒

科研抗体

生化检测试剂盒

科研细胞

分子生物学试剂

PCR荧光定量检测试剂盒

检测试剂盒

PCR相关试剂

细胞培养

公司信息

人:
刘小姐
话:
021-52960952
机:
15000017673
售后电话:
15000017673
真:
021-57690166
址:
上海市闵行区碧泉路36弄银宵大厦
编:
200000
址:
www.bhsy-e.com/
铺:
https://www.hbzhan.com/st582730/
给他留言

血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒常用的测定方法

2025-4-15  阅读(15)

  ELISA是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的免疫分析技术。酶联免疫吸附试验的标准程序,通常是把蛋白、抗体、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗体(capture Ab)固定在固相载体上,再加入一级检测抗体(primarydetection Ab),形成一个抗原抗体的复合物。如果该抗体已经用酶(enzyme)标记了,即可用来直接测定抗原的量,若无,则可利用另一个酶标记的二级抗体来测定抗原的量。测定抗原量的方法是加入该酶的底质(substrate),作用后产生出现的颜色深浅和样本中的抗原量呈正比的关系,依此原理计算出样本中的抗原总量或浓度。
 
  1.直接法(direct ELISA)
 
  将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标记的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。
 
  优势:操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应。
 
  缺点:试验中的一抗都得用酶标记,但不是每种抗体都适合做标记,费用相对提高。
 
  2.间接法(indirect ELISA)
 
  此测定方法与直接法类似,差别在于一级抗体没有酶标记,改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
 
  优势:二抗可以加强信号,而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它多的免疫反应性。
 
  缺点:交互反应发生的机率较高。
 
  3.双抗体夹心法(sandwich ELISA)
 
  被检测的抗原包被在两个抗体之间,其中一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。另一个则是检测抗体,此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量;或不标记,再透过酶标记的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体必须小心选取,才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。
 
  优势:高灵敏、高专一性,抗原无须事先纯化。
 
  缺点:抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。
 
  4.竞争法(competitive ELISA)
 
  样本里的抗原(自由抗原)和纯化并固定在固相载体上的抗原(固定抗原)一起竞争相同的抗体,当样品里的自由抗原越多,就可以结合越多的抗体,而固定抗原就只能结合到较少的抗体,反之亦然。经清洗步骤,洗去自由抗原和抗体的复合物,只留下固定抗原和抗体的复合物,拿来与只有固定抗原的对照组结果相比较,根据呈色差异就可计算出样品里的抗原含量。
 
  优势:可适用比较不纯的样本,而且数据再现性很高。
 
  缺点:整体的敏感性和专一性都较差。
 


产品对比 二维码 在线交流

扫一扫访问手机商铺

对比框

在线留言