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上海邦景实业有限公司
主营产品： 进口elisa试剂盒，细胞株，细胞系，菌种 |
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更新时间：2023-03-16 09:58:47浏览次数：243
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中文名称：pTG-T载体连接试剂盒
英文名称：pTG-T Vector Ligation Kit
产品规格：20次|60次
发货周期：1～3天
产品货号：BJ-F0164745
产品介绍：
本试剂盒适用于PCR产物的克隆，可将PCR产物连接到pTG-T载体上，便于进行下一步实验。DNA片段连接是经常出问题的步骤，为了提高连接效率，本试剂盒提供了两种连接Buffer供不同情况选择：10×Ligation Buffer Ⅰ适合置于16℃连接过夜，可获得佳连接效果；2×Ligation Buffer Ⅱ为快速连接Buffer，25℃连接10分钟即可转化，快捷方便。 英文名称：pTG-T Vector Ligation Kit 产品规格：20次|60次 本试剂盒适用于PCR产物的克隆，可将PCR产物连接到pTG-T载体上，便于进行下一步实验。DNA片段连接是经常出问题的步骤，为了提高连接效率，本试剂盒提供了两种连接Buffer供不同情况选择：10×Ligation Buffer Ⅰ适合置于16℃连接过夜，可获得佳连接效果；2×Ligation Buffer Ⅱ为快速连接Buffer，25℃连接10分钟即可转化，快捷方便。 pTG-T是一种高效克隆PCR产物的专用载体，它是由一种克隆载体在EcoRV酶切位点处切开，在两侧的3′端添加T而成。由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR产物的3′端添加一个A，可与pTG-T 3′端的T互补连接，因此可大大提高PCR产物的连接和克隆效率。连接使用的PCR片段3′端应带有A末端，如果是使用pfu等高保真聚合酶扩增的不带A末端的片段，应使用平末端连接试剂盒先加A末端后再连接。 带有插入片段的重组子可根据α互补原理，进行蓝白斑筛选，判断载体中有无外源基因的插入（白色克隆为阳性重组克隆，蓝色的为载体自连的克隆，具体筛选原理参考分子克隆等书籍）。克隆后，可使用通用引物T7、SP6进行测序。 保存条件：-20℃保存，避免反复冻融（载体和连接试剂可以适当的分装成小份，防止反复冻融，以保证质量）。 |
使用方法：本产品仅用于科研
注意：标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)。
鼻拭子的采集：将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集：用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封；每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上，连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内，拧紧盖，在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本，可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力，内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱)，放入冰排，然后以柔软物质填充，并密封，由专人(2人)运送，不得邮寄，最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达，则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的，需在4℃冰箱短时间暂存，并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃～-40℃时不稳定，故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
动物细胞周期G2期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒
动物细胞周期M期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒
通用型动物细胞周期（G1/S和G2/M期）同步（SYNCHRONY）处理试剂盒
植物细胞周期G0期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒
植物细胞周期G1早期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒
小鼠脂联素(ADP)elisa ，英文名： ADP ELISA Kit
小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA检测试剂盒Mouseangiotensinogen,aGTELISAKit 96T/48T
人卷曲螺旋, 肌球蛋白样BCL2 结合蛋白/自噬基因Beclin 1(BECN1)免疫试剂盒 Human BECN1 ELISA Kit
Ratadiponectin,ADPELISAKit大鼠脂联素(ADP)elisa规格：96T/48T
载玻片细胞TNFBETA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次
Mouse17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSelisa小鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)elisa规格：96T/48T
pTG-T载体连接试剂盒直接红素D-BIL试剂盒化学氧化法 96T 微板法
脂质过氧化物LPO含量测试盒 20T 50T 100T 比色法
脂肪组织蛋白提取试剂盒50T
脂肪组织蛋白提取试剂盒100T
脂肪酸合成酶（FAS）测试盒
生物医学实验中，常常需要从液体样品(如血浆，培养基)中纯化病毒，但由于病毒颗粒十分细小，传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来，此操作非常繁琐，并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点，本公司开发了本产品。
