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上海邦景实业有限公司
主营产品： 进口elisa试剂盒，细胞株，细胞系，菌种 |
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更新时间：2022-06-23 13:38:41浏览次数：148
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中文名称：总蛋白提取试剂盒
英文名称：Total protein extraction kit
产品规格：50T|100T
发货周期：1～3天
产品货号：BJ-F0165227
产品介绍：
本试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织中提取总蛋白。配合其他组份时，也可以用于植物、细菌、真菌、酵母等样品的总蛋白提取。 本试剂盒含有的*配方能够有效溶解细胞膜组份，包括细胞质膜、核膜和各种细胞器膜。试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。 本试剂盒提取的蛋白可用于WB、蛋白质电泳、免疫共沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。 本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白，下游应用范围广，提取液裂解细胞的能力较温和，需要根据实际样本情况优化裂解时间。 本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分，不可直接用于2D电泳，如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳，请使用我公司其他货号的试剂盒(HR0165)。也可以将后样品除盐后再用于2D电泳，用脱盐柱脱盐处理(HR0389)。 本试剂盒按每个处理样本50mg细胞/组织计(大约50μL细胞压积)，如果需要处理大量的细胞/组织，将提取液按细胞体积的1:10加入细胞沉淀即可。每个50T试剂盒大约可以提取2.5g细胞/组织样本的总蛋白。根据不同的细胞类型，100mg细胞沉淀物(107个细胞)的总蛋白质产量大约为6mg左右。 产品特点： 使用方便，不需经过研磨、反复冻融、声破碎等前处理。 提取过程简单方便，将蛋白提取的时间缩短至30分钟～1小时。 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。 总蛋白提取液：含多种有效成分，可以充分释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝蛋白酶、半胱蛋白酶、天冬蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。 |
使用方法：本产品仅用于科研
注意：标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)。
鼻拭子的采集：将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集：用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封；每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上，连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内，拧紧盖，在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本，可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力，内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱)，放入冰排，然后以柔软物质填充，并密封，由专人(2人)运送，不得邮寄，最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达，则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的，需在4℃冰箱短时间暂存，并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃～-40℃时不稳定，故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
细胞多聚ADP核糖聚合酶－1（PARP-1）活性比色法定量检测试剂盒
组织多聚ADP核糖聚合酶－1（PARP-1）活性比色法定量检测试剂盒
细胞异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒
组织异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒
尿酶活性比色法定量检测试剂盒
小鼠酸(PK)elisa ，英文名： PK ELISA Kit
大鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA检测试剂盒RatAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 96T/48T
人α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫试剂盒 Human α-SMA ELISA Kit
英文名称MouseICAM-2/sCD102ELISAKit小鼠细胞间粘附分子-2(ICAM-2/sCD102)规格：96T/48T
SiRNA大量SperfusinX脂质体细胞转染试剂盒10次
rabbitImmunoglobulinA,IgAelisa兔子免疫球蛋白A(IgA)elisa规格：96T/48T
总蛋白提取试剂盒小鼠层粘连蛋白(Laminin)elisa检测试剂盒
小鼠层连蛋白/板层素(LN)elisa检测试剂盒免费代测
小鼠层连蛋白/板层素(LN)elisa检测试剂盒
小鼠层连蛋白/板层素(LN)elisa分析检测试剂盒
小鼠层连蛋白(Laminin)elisa检测试剂盒
生物医学实验中，常常需要从液体样品(如血浆，培养基)中纯化病毒，但由于病毒颗粒十分细小，传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来，此操作非常繁琐，并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点，本公司开发了本产品。
