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上海邦景实业有限公司
主营产品： 进口elisa试剂盒，细胞株，细胞系，菌种 |
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公司信息
- 联系人：
- 刘小姐
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- 上海市闵行区碧泉路36弄银宵大厦
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- 200000
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- www.bhsy-e.com/
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- 品牌 其他品牌
- 厂商性质 经销商
- 所在地 上海市
更新时间：2022-06-13 11:17:41浏览次数：135
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操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。
中文名称：Rosetta(DE3)感受态细胞
英文名称：Rosetta(DE3)Competent Cell
产品规格：100μl×10支
发货周期：1～3天
产品货号：BJ-F0164576
生物医学实验中，常常需要从液体样品(如血浆，培养基)中纯化病毒，但由于病毒颗粒十分细小，传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来，此操作非常繁琐，并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点，本公司开发了本产品。
产品介绍：
本产品是采用进口Rosetta菌株，经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。Rosetta菌株是携带氯抗性质粒BL21的衍生菌，补充大肠杆菌缺乏的6种稀有密码子(AUA，AGG，AGA，CUA，CCC，GGA)对应的tRNA，提高外源基因，尤其是真核基因在原核系统中的表达水平。使用pUC19质粒检测，转化效率可达107。 使用方法： 1、取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。 2、待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1ng螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。 3、42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。 4、向每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150 rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。 5、根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。 注意： 1)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。 2)新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。 3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。 储存条件：-80℃。 |
使用方法：本产品仅用于科研
注意：标本采集人员需按有关规定做好个人防护。咽、鼻拭子最好在发病的3天采集。
在安全柜内将本产品分装到自备的、螺旋盖内有橡胶圈的5mL旋盖塑料管里(一级容器)。
鼻拭子的采集：将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入上步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
咽拭子的采集：用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将棉签浸入第一步得到的、装有3mL本产品的旋盖离心管中，弃去拭子尾部，拧紧螺旋盖。
直接在一级容器上用油性记号笔写明样本的种类、采样时间、编号、患者姓名。
将密闭后的标本放入大小适合的塑料袋内密封；每袋装一份标本。同时也将标本有关信息填在标本送检表上，连同一级容器封于塑料袋内。
将装标本的密封袋放入自备的带螺旋盖内有橡胶圈的塑料容器(二级容器)内，拧紧盖，在容器上标明有关信息。同一患者2份以上的密封标本，可以放在同一个二级容器内。二级容器要承受不少于95 KPa的压力，内衬具吸水和缓冲能力的物质。所有容器必须印有生物危险标注。
将二级容器摆放在专用运输箱内(或疫苗运输箱)，放入冰排，然后以柔软物质填充，并密封，由专人(2人)运送，不得邮寄，最好使用专车。
采集的标本若不能在24小时内送达，则应尽快在-70℃以下保存。无-70℃条件的，需在4℃冰箱短时间暂存，并尽快联系递送标本。流感病毒在-20℃～-40℃时不稳定，故长期保存最好在-70℃温度以下进行。
TEM电镜免疫细胞化学AP酶联NBT/BCIP直接检测试剂盒（含AP一抗）
冰冻切片免疫组织化学HRP酶联DAB基础检测试剂盒（无一抗和二抗）
冰冻切片免疫组织化学HRP酶联DAB间接检测试剂盒（含HRP二抗）
冰冻切片免疫组织化学HRP酶联DAB*间接检测试剂盒
冰冻切片免疫组织化学HRP酶联DAB直接检测试剂盒（含HRP一抗）
小鼠线粒体解偶联蛋白1(UCP1)elisa ，英文名： UCP1 ELISA Kit
兔子主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISA检测试剂盒RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/RLAⅢELISAKit 96T/48T
牛游离纤溶抑制因子/激活的纤溶抑制物(TAFI)免疫试剂盒 Bovine FreeThrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA Kit
英文名称HumanEndothelialniicoxidesyhase3(eNOS-3)ELISAKit人内皮型合成酶3(eNOS-3)规格：96T/48T
蛋白样品液相法去内毒素试剂盒20次
RatN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPelisa大鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-(AcSDKP)elisa规格：96T/48T
Rosetta(DE3)感受态细胞小鼠磷酸肌醇3(PI3K)elisa分析检测试剂盒
小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白(pAMPK)elisa检测试剂盒
小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白(pAMPK)elisa分析检测试剂盒
小鼠磷酸化细胞外信号调节(pERK)elisa检测试剂盒免费代测
小鼠磷酸化细胞外信号调节（p-ERK）elisa检测试剂盒
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
