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人胚肾细胞:293 HEK-293
人胚肾细胞:293 HEK-293
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更新时间:2022-04-27 15:00:20浏览次数:259

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【简单介绍】
货号 BJ-X96321
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我司全程提供细胞生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、组织、冻存条件等复苏及冻存细胞株说明书信息,我们专业您的细胞系实验,让您实验再无烦扰!

产品名称规格分类货号
人胚肾细胞:293 [HEK-293] 1×10⁶cells/T25培养瓶细胞系BJ-X96321

商品介绍:

名称    293 [HEK-293] (人胚肾细胞)


别称    Hek293; HEK-293; HEK 293; HEK:293; 293; 293 HEK; Human Embryonic Kidney 293

种属    人类

年龄(性别)    胎儿

组织来源    胚胎肾;以腺病毒5DNA进行转化

生长特性    贴壁细胞

细胞形态    上皮细胞样

背景描述    293 [HEK-293]细胞是剪切过的人腺病毒5(Ad5)转染的人胚肾细胞形成的永生化细胞,293 [HEK-293]细胞包含并表达转染的Ad5基因。早期报道中指出,293 [HEK-293]细胞基因组中含有腺病毒5(Ad5)基因组的左侧端和右侧端的DNA,但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现,Ad5的1-4344位线性核苷酸整合入293 [HEK-293]细胞19号染色体(19q13.2)。293 [HEK-293]细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主,可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体,由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。

生物安全等级    2

生长培养基    MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S

推荐传代比例    1:3-1:4

推荐换液频率    2~3次/周

倍增时间    ~24-30小时

冻存条件    冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮

培养条件    气相:空气,95%;CO₂,5%温度:37℃

致瘤性    Yes, forms tumors in nude mice.

受体表达情况    vitronectin

注意事项    该细胞贴壁松散,操作时请尽量轻柔;换液时需预热培养基;收货如有大块脱落的细胞团,为正常现象,请按照收货注意事项处理。

98.jpg

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

实验报告:


一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;


二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备

记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。

5.研究的范围比较广泛

应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;

适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。

6.研究的费用相对较经济

可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

22RV1 (人前列腺癌细胞)     人前列腺癌细胞:22RV1     1×10⁶cells/T25培养瓶

293T [HEK-293T](人胚肾细胞)     人胚肾细胞:293T [HEK-293T]    1×10⁶cells/T25培养瓶

3T3-L1 (小鼠胚胎成纤维细胞)    小鼠胚胎成纤维细胞:3T3-L1     1×10⁶cells/T25培养瓶

4T1 (小鼠乳腺癌细胞)     小鼠乳腺癌细胞:4T1     1×10⁶cells/T25培养瓶

6T-CEM (人T细胞白血病细胞)     人T细胞白血病细胞:6T-CEM     1×10⁶cells/T25培养瓶

769-P (人肾细胞腺癌细胞)     人肾细胞腺癌细胞:769-P     1×10⁶cells/T25培养瓶

786-O [786-0] (人肾透明细胞腺癌细胞)     人肾透明细胞腺癌细胞:786-O [786-0]     1×10⁶cells/T25培养瓶

95-D [PLA-801D] (人高转移肺癌细胞)     人高转移肺癌细胞:95-D [PLA-801D]     1×10⁶cells/T25培养瓶

A172 (人胶质母细胞瘤细胞)     人胶质母细胞瘤细胞:A172     1×10⁶cells/T25培养瓶

A2780 (人卵巢癌细胞)    人卵巢癌细胞:A2780     1×10⁶cells/T25培养瓶

A-375 (人恶性黑色素瘤细胞)     人恶性黑色素瘤细胞:A-375     1×10⁶cells/T25培养瓶

A-431 (人表皮癌细胞)     人表皮癌细胞:A-431     1×10⁶cells/T25培养瓶

A549 [A-549] (人非小细胞肺癌细胞)     人非小细胞肺癌细胞:A549 [A-549]     1×10⁶cells/T25培养瓶

A-673 (人横纹肌肉瘤细胞)     人横纹肌肉瘤细胞:A-673     1×10⁶cells/T25培养瓶

A9 (小鼠皮下结缔组织细胞)    小鼠皮下结缔组织细胞:A9     1×10⁶cells/T25培养瓶

AAV-293 (人胚肾细胞)     人胚肾细胞:AAV-293     1×10⁶cells/T25培养瓶

Acc-2 (人涎腺腺样囊性癌细胞)    人涎腺腺样囊性癌细胞:Acc-2     1×10⁶cells/T25培养瓶

Alpha-Synuclein    核突触蛋白抗体

beta-Actin (Loading Control)    β-肌动蛋白/β-Actin 抗体(内参抗体)

beta-Amyloid 1-42 (CT)    β淀粉样肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗体

beta Amyloid 1-16    β淀粉样肽1-16/Aβ1-16抗体

beta Amyloid 1-28    β淀粉样肽1-28/β-Amyloid 1-28抗体

ARIP2a    激活素受体2A抗体

Aquaporin 5    水通道蛋白5抗体

beta Amyloid 1-40    β淀粉样肽(1-40)抗体

beta Amyloid 1-42    β淀粉样肽(1-42)抗体

APOA1    载脂蛋白A1抗体

Beta-arrestin 1    β-抑制蛋白1抗体

Ankyrin B    锚定蛋白B抗体

ATP7A    铜转运蛋白质α链抗体

Amphetamine(2A3F)

ASMTL    ASMTL蛋白抗体

TRA16    激素受体相关蛋白16抗体

人胚肾细胞:293 [HEK-293] beta-Amyloid 1-40 (CT)    β淀粉样肽1-40 C端/Aβ1-40 C端抗体

ASB13    含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族13抗体

beta Amyloid 31-35    β淀粉样肽(31-35)/Aβ 31-35 抗体




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