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上海联迈生物工程有限公司
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人白介素 1α（ IL-1α）检测 试剂盒
规格： 96T
检测范围：4.69pg/ml→300pg/ml
敏感性： ＜0.5pg/ml
特异性： 系统和其它因子无交叉反应。
保存： 2-8℃（频繁使用时）；-20℃（长时间不用时）。
有效期： 6 个月（4℃）；12 个月（-20℃）。
用途： 用于体外定量分析人血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液
人白介素 1α( IL-1α)检测 试剂盒
规格： 96T
检测范围：4.69pg/ml→300pg/ml
敏感性： ＜0.5pg/ml
特异性： 系统和其它因子无交叉反应。
保存： 2-8℃（频繁使用时）；-20℃（长时间不用时）。
有效期： 6 个月(4℃)；12 个月（-20℃）。
用途： 用于体外定量分析人血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液
人白介素 1α( IL-1α)检测 试剂盒工作原理
Interleukin 1α。白介素 1α。初被称为淋巴细胞活化因子（LAF），激活 T 细胞和淋巴细胞，促
其生产和分泌白介素 2。白介素 1α主要由单核、巨噬细胞产生，在炎症和免疫反应中起关键作
用。白介素 1α和白介素 1β结合同一细胞表面受体，引起相同的生物学反应。本试剂盒采用重
组人白介素 1α作为标准品，159 个氨基酸，分子量 18KDa。
所提供的人 IL-1αELISA Kit 是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒（Enzyme
Linked-Immuno-Sorbent Assay, ELISA）。预先包被的抗体为单克隆抗体，克隆号 ILA9-H18。检测
相抗体也是单克隆抗体，克隆号 ILA8-H12，经生物素（biotin）标记。样品和生物素标记抗体先
后加入酶标板孔反应后，PBS 或 TBS 洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过 PBS
或 TBS 的*洗涤后用底物 TMB 显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作
用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的人 IL-1α呈正相关
内容 | 规格 | 数量 |
预包被抗 IL-1α 抗体的 96 孔板 | 96T | 1 |
冻干标准品 | 10ng/管 | 2 |
生物素标记 | 130ul | 1 |
亲和素-过氧化物酶复合物 | 130ul | 1 |
样品稀释液 | 30ml | 1 |
抗体稀释液 | 12ml | 1 |
ABC 稀释液 | 12ml | 1 |
TMB 显色液 | 10ml | 1 |
TMB 终止液 | 10ml | 1 |
洗涤缓冲液(25X) | 20ml | 1 |
封板膜 |
| 2 |
说明书 |
| 1 |
人白介素 1α( IL-1α)检测 试剂盒需要而未提供的试剂和器材
1. 标准规格酶标仪。
2. 自动洗板机。
3. 恒温箱
4. 系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，用多通道移液器。
5. 干净的试管和 Eppendof 管。
6. 用去离子水将 25X 洗涤缓冲液稀释 25 倍，成 1X 洗涤缓冲液。
注意事项
1． 使用前 TMB 显色液应为无色透明溶液，若发现颜色异常，请及时与厂家。
2． 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。
3 要严格避免操作过程中酶标板干燥。干燥会使酶标板上生物成份迅速失活。
4． 为免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和试管。
5． 禁止混用不同批次试剂盒内的试剂。
6. 本公司提供的 96 孔酶标板是单条可拆型酶标板，用户可按需求使用；剩余的酶标板请
按保存条件贮存。
7. 揭封板膜和覆盖封板膜时应避免用力过大导致液体溅出。
洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将 1X 洗涤缓冲液至少 300ul 注入孔内，浸泡 1-2 分钟。根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
样品的准备和保存
样品如果不立即分析，应分装后冷冻保存，且避免反复冻融。
细胞培养上清——离心去除沉淀，立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
血清——用干净试管收集血液，室温凝固 30 分钟，离心 1500×g 15 分钟，收集血清。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
血浆—在冰块上收集肝素或 EDTA 抗凝血，抽血后 30 分钟内离心 1500×g 15 分钟。血浆在 2-8℃进一步离心 10000×g 10 分钟，以*清除血小板。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
细胞裂解液——对于贴壁细胞，去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。加入适量裂解液，用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常 10 秒后，细胞就会被裂解。对于悬浮细胞，离心收集细胞，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。加入适量裂解液，用枪吹打把细胞吹散，用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后，10000—14000g 离心 3-5 分钟，取上清。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
样品稀释的一般原则
用户须估计样品待测因子的含量，决定适当的稀释倍数，以使稀释后样品中待测因子的浓度处于ELISA 试剂盒的*检测范围。根据待测因子含量高、中、低的不同，分别采取不同的
人白介素 1α( IL-1α)检测 试剂盒稀释方案：
高——指待测因子在 20-200ng/ml。一般按 1：100 稀释。297ul 样品稀释液加 3ul 样品。
中——指待测因子在 2-20ng/ml。一般按 1：10 稀释。225ul 样品稀释液加 25ul 样品。
低——指待测因子在 31.2-2000pg/ml。按 1：2 稀释。100ul 样品稀释液加 100ul 样品。
特低——指待测因子≤31.2pg/ml。样品一般不做稀释，或按 1：2 稀释。
操作程序总结：
1． 加样品和标准品，37℃反应 90 分钟。不洗。
2． 加生物素标记抗体，37℃反应 60 分钟。1X 洗涤缓冲液洗涤 3 次。
3． 加 ABC，37℃反应 30 分钟。1X 洗涤缓冲液洗涤 5 次。
4． TMB37℃反应 15-20 分钟。
5． 加入 TMB 终止液，读数。
人 胰岛素受体磷酸化 P-ISR Insulin Receptor phosphorylation
人 烟碱型乙酰胆碱受体 N-AChR nicotinic acetylcholine receptor
人 艰难梭菌毒素B CDT-B Clostridium difficile toxin B
人 III型肽精氨酸脱亚氨基酶 PAD-3 Ab PAD-3 Antibody
人 carp Ab carp Antibody
人 异性脑炎特异性IgM抗体 JEIgM Ab Japanese encephalitis IgM antibody
人 高香草酸 HVA Homovanillic acid
人 帕金森氏病2Parkin Park2 Parkinson disease 2 parkin
人 生长停滞基因C Gas-C Growth arrest specific protein C
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