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上海联迈生物工程有限公司
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柱式土壤RNAout由于土壤中有机质含量丰富，尤其是其中的腐殖酸对RT-PCR等后续反应有极大的抑制作用，所以从土壤微生物提取高纯度的RNA一直是十分棘手的问题。本产品是在LMAI Bio土壤RNAOUT（CAT#:90704）基础上开发的柱式土壤RNA提取产品，它具有下列特点：
1. 操作比非柱式法更加简单快速，处理一个样品只需要约十几分钟。
柱式土壤RNAout
名称 | 规格 | 价格 | 手册 |
柱式土壤RNAout | 50次 | 1590元 |
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由于土壤中有机质含量丰富，尤其是其中的腐殖酸对RT-PCR等后续反应有极大的抑制作用，所以从土壤微生物提取高纯度的RNA一直是十分棘手的问题。本产品是在LMAI Bio土壤RNAOUT（CAT#:90704）基础上开发的柱式土壤RNA提取产品，它具有下列特点：
1. 操作比非柱式法更加简单快速，处理一个样品只需要约十几分钟。
2. 去污染效果好，RNA纯度更高，平均 OD260/280一般都在2.0左右。
3. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。
4. 性价比高于进口的柱式土壤RNA提取产品。
5. 试剂无毒无害，环保。
RNA提取法：试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚，其中异硫氰酸胍可裂解细胞，促使核蛋白体的解离，使RNA与蛋白质分离，并将RNA释放到溶液中。当加入氯时，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA进入水相，离心后可形成水相层和有机层，这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA，有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤：
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中，每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下，染色体DNA的氢键断裂，双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂，但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会*分离，当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时，变性的质粒DNA又恢复原来的构型，保存在溶液中，而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构，通过离心，染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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