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上海联迈生物工程有限公司
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BL21（AI）大肠杆菌BL21（AI）来源于BL21菌株，是大肠杆菌B/r型菌株（E.coli B/r），在araBAD操纵子的araB位点含有T7 RNA聚合酶基因，T7 RNA聚合酶基因的表达可以通过阿拉伯糖或者葡萄糖来调节，使用L-阿拉伯糖诱导araBAD启动子下游的蛋白表达。使用葡萄糖可以抑制araBAD启动子下游的蛋白表达。但菌株不含有lon蛋白酶。BL21（AI）是膜外蛋白酶OMPT
BL21(AI)大肠杆菌
名称 | 规格 | 价格 | 手册 |
BL21(AI)大肠杆菌 | 1管 | 询价 |
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BL21(AI)来源于BL21菌株，是大肠杆菌B/r型菌株（E.coli B/r），在araBAD操纵子的araB位点含有T7 RNA聚合酶基因，T7 RNA聚合酶基因的表达可以通过阿拉伯糖或者葡萄糖来调节，使用L-阿拉伯糖诱导araBAD启动子下游的蛋白表达。使用葡萄糖可以抑制araBAD启动子下游的蛋白表达。但菌株不含有lon蛋白酶。BL2BL21(AI)大肠杆菌1（AI）是膜外蛋白酶OMPT的缺陷型菌株，该酶的缺失能够有效防止表达的异源目的蛋白在细菌体内的降解。BL21-AI感受态适用于任何以T7启动子为基础的表达载体，能够进行高水平的重组蛋白表达。BL21-AI感受态细胞能够有效表达对其他BL21细胞有毒或生长抑制的蛋白。
RNA提取法：试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚，其中异硫氰酸胍可裂解细胞，促使核蛋白体的解离，使RNA与蛋白质分离，并将RNA释放到溶液中。当加入氯时，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA进入水相，BL21(AI)大肠杆菌离心后可形成水相层和有机层，这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA，有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤：
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中，每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下，染色体DNA的氢键断裂，双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂，但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会*分离，当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时，变性的质粒DNA又恢复原来的构型，保存在溶液中，而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构，通过离心，染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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