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上海联迈生物工程有限公司


一步式PAGE染液

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所  在  地上海市

更新时间:2018-06-15 16:32:51浏览次数:166次

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产品简介

一步式PAGE染液本产品是目前较简单的、灵敏度在纳克级的蛋白质PAGE染色方法。本产品不需要脱色处理,灵敏度高,使用方便,*可以取代较常用的考马斯亮蓝G250 (Coomassie Brilliant Blue G250) PAGE染色。
1. 一步染色,可以不需脱色,不必担心脱色过度,一小时内完成整个过程。

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一步式PAGE染液

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一步式PAGE染液

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本产品是目前简单的、灵敏度在纳克级的蛋白质PAGE染色方法。本产品不需要脱色处理,灵敏度高,使用方便,*可以取代常用的考马斯亮蓝G250 (Coomassie Brilliant Blue G250) PAGE染色。 
1. 一步染色,可以不需脱色,不必担心脱色过度,一小时内完成整个过程。
2. 高灵敏度,比考马斯亮蓝250更灵敏,接近银染,达到n水平。
3. 不需昂贵仪器,肉眼即可观察结果,不象其他纳克级的染色方法需要贵重的仪器设备(如SYPRO系列的高灵敏度的荧光染料需要荧光成像系统)。
4. 与普通扫描仪,mass spectrometry等兼容,便于保存数据和后续处理。
5. 安全环保,不需要使用有毒的甲醇和有刺激味道的乙酸。
6. 即开即用,经济实惠,可以多次使用。
RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
实验步骤:
1、RNA的提取;
2、反转录合成cDNA;
3、PCR扩增;
4、产物的电泳和结果的测定。
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在zui条件下进行。
碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会*分离,当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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