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上海博湖生物科技有限公司
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防止细胞培养污染建议
2022-6-28 阅读(641)
细胞培养基本概述：
细胞的生长需要营养环境，用于维持细胞生长的营养基质称为培养基。培养基按其物理状态可分为液体培养基和固体培养基。液体培养基用于大规模的工业生产以及生理代谢等基本理论的研究工作。液体培养基中加入一定的凝固剂(如琼脂)或固体培养物(如麸皮、大米等)便成为固体培养基。固体培养基为细胞的生长提供了一个营养及通气的表面，在这样一个营养表面上生产的细胞可形成单个菌落。因此，固体培养基在细胞的分离、鉴定、计数等方面起着相当重要的作用。从多细胞生物中分离所需要细胞和扩增获得的细胞以及对细胞进行体外改造，观察，必须解决细胞离体培养问题，同微生物细胞培养的难易相比，比较困难的是来自多细胞生物的单细胞培养，特别是动物细胞的培养。
细胞培养泛指所有体外培养，其含义是指从动物活体体内取出组织，于模拟体内生理环境等特定的体内条件下，进行孵育培养，使之生存并生长。细胞培养工作现已广泛应用于生物学、医学、新药研发等各个领域，成为最重要的基础科学之一。
细胞培养
然而，细胞培养过程中极易被污染，以下列举防止细胞培养污染建议:
1、从培养箱取放细胞前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。培养瓶放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。
2、操作的时候防护服、口罩、手套缺一不可。操作前，准备好所有实验所需物品，以减少走动，物品需有序摆放在超净台触手可及的地方，同时空留足够操作空间。
3、操作时，试剂不用尽量及时盖上盖子，移至操作区外围，尽量不要从开口容器上经过。
4、使用移液枪时，将容器倾斜以便于移液，切勿将枪杆碰触瓶口及内壁。一旦发生倒吸情况，要及时用酒精棉球擦拭，以免液体残留导致细菌滋生。
5、先取试剂、耗材，再取移液枪、an装枪头。很多人习惯先an 装枪头，然后去拿试剂、耗材，殊不知无意间枪头已经触碰其他地方导致污染。
6、向废液缸打废液时，需轻柔，以免造成水花四溅，污染枪头、枪体。实验结束，及时倒掉废液缸垃圾，冲洗之后喷洒酒精，放入超净台紫外照射杀菌。
7、冻存细胞时冻存管盖子需拧紧。复苏细胞时，从液氮罐取出冻存管，轻拧盖子，以确认盖子是否拧紧。镊子夹住冻存管盖子与管体交界处，在37度水浴锅中快速解冻，水面不可超过冻存管盖沿；不建议直接扔进水中，以免水渗入造成污染。操作过程中，对于那种模糊不清的、你不确定的有没有污染的，宁愿认为是有菌的弃掉！也不要心存侥幸！
