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上海博湖生物科技有限公司
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Taq DNA聚合酶具有的特点
2023-5-29 阅读(843)
Taq DNA多聚酶是耐热DNA聚合酶，是从水栖高温菌（Thermus aquaticus）中分离的，由分子量为109000的一条多肽链构成。dna聚合酶具有几种功能：一是聚合作用，以DNA为模板，将dNTP中的脱氧单核苷酸逐个加到3’末端。二是有3’→5’外切酶活力，能识别和消除错配的引物末端，与复制过程中校正功能有关。三是5’→3’外切酶活力，它能从5’端水解核苷酸，还能经过几个核苷酸起作用，切除错配的核苷酸。在体外实验中，Taq DNA聚合酶的出错率为10-4～10-5。
Taq DNA聚合酶具有以下特点：
1、耐高温，在70℃下反应2小时后其残留活性在90%以上，在93℃下反应2小时后其残留活性是仍能保持60%，而在95℃下反应2小时后为原来的40%。
2、在热变性时不会被钝化，故不必在扩增反应的每轮循环完成后再加新酶。
3、一般扩增的PCR产物长度可达2.0 kb，且特异性也较高。
一典型的PCR反应约需的酶量为2.5u（总反应体积为50ml时），浓度过高可引起非特异性扩增，浓度过低则合成产物量减少。
