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上海博湖生物科技有限公司
主营产品： 高密度脂蛋白ELISA检测试剂盒,同型半胱氨酸ELISA检测试剂盒,游离脂肪酸ELISA检测试剂盒 |
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细胞冷冻蚀刻复型技术应用结果
2019-12-27 阅读(2024)
细胞应用结果
细胞膜的脂质双分子层被劈分开以后，其外层的内表面称胞质外面或E面(extracellular face, E face);其内层的外表面称胞质面或P面(plasmic face, P face)。P面常见许多膜内粒子，E面则较少。一般认为膜内粒子是细胞膜结构中的向前蛋白颗粒的图像。膜内粒子的数量与分布随膜的功能状态而变化，因此冷冻蚀刻复型技术适用于生物膜内部结构与功能的研究。
细胞冷冻蚀刻复型主要步骤
冷冻 将样品组织浸入冷冻保护剂中，然后再将样品放入液氮(-196摄氏度)内快速冷冻。
断裂 在真空条件下使样品断裂，断裂面常为组织、细胞的薄弱部位，如细胞膜脂质双分子层的疏水极之间。
蚀刻 在真空内使温度回升到-100摄氏度，使断裂面含游离水较多之处的冰晶生化，形成凹凸不平的"浮雕"效果。
复型 在断裂面上先后喷镀铂和碳，形成金属复型膜称复型(replica)，用次氯酸钠等腐蚀夜将组织溶解，取复型膜在透射电镜下观察。
