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大鼠冠状动脉内皮细胞培养试剂盒操作说明

2019-12-11  阅读(91)

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【详细说明】

 

                        大鼠冠状动脉内皮细胞培养试剂盒操作说明

   雪还在下着,不一会儿就变成了鹅毛大雪,随风飘舞,天地间变成了白茫茫的一片,这些可爱的雪 精灵还在半空中跳着舞呢。这个雪和南北极的雪不同的,那里的雪下起来,像利剑一样,铺天盖地的, 四周变得昏暗,不明亮,不见一丝光。而这里的雪呢?轻飘飘的,就如从天空中撒下千万颗珍珠。接下来介绍 大鼠冠状动脉内皮细胞培养试剂盒操作说明。

以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

特性:

(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。

(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。

(3)原代细胞培养末期液氮冻存。

(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。

(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。

(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。



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