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上海通蔚生物有限公司
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阅读:419发布时间:2019-2-22
我们知道,可以用作ELISA测定的标本很广泛,包含了体液、分泌物和排泄物等,均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。这些标本收集的时刻、方法和保存都有必定的要求。今日上海通蔚生物为您解说:ELISA操作严格要求定当做出好实验。
按试剂盒阐明书的要求预备实验中需用的试剂。ELISA顶用的蒸馏水或去离子水,包含用于洗刷的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液运用pH计丈量较正。从冰箱中取出的实验用试剂应待温度与室温平衡后运用。试剂盒中本次实验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
试剂盒的制作:关于每种细胞因子应仔细阅读阐明书,留意每批的细节。在运用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批阐明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶。一般待测抗原标准曲线的线性规模的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、扩大试剂盒、第三类试剂、或改动酶底物系统可在必定规模内进步灵敏度。为了优化灵敏度,建议孵育标准品和标本。若运用过氧化物酶作为显色系统,应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物ELISA试剂盒酶的活性。
试剂盒的操作因固相载体的构成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
洗板方法:
① 手工洗板,吸去(不行触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几回;将推荐的洗刷缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
② 主动洗板,如果有主动洗板机,应在娴熟运用后再用到正式实验过程中。
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