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该怎么进行ELISA试剂盒洗刷工作

阅读:272发布时间:2019-9-5

ELISA试剂盒进行洗刷工作时,主要选用以下两种办法。

流水冲刷式:用于小珠载体的洗刷,洗刷液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗刷时附接一特别设备,使小珠在流水冲击下不断地翻滚淋洗,持续冲刷2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲刷式则比方淋浴,其洗刷效果更为*,且也简练、快速。已有试验标明,流水冲刷式相同也适用于微量滴定板的洗刷。洗刷时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔外表,洗刷效果更佳。

浸泡式:吸干或甩干孔内反响液;

用洗刷液过洗一遍(将洗刷液注满板孔后,即甩去);

浸泡,行将洗刷液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇晃,浸泡时刻不可随意缩短;

吸干孔内液体。吸干应*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;

洗刷3-4次,或按说明规则。在间接法中如本底较高,可增加洗刷次数或延伸浸泡时刻。

ELISA试剂盒的设置规范曲线样品的规范浓度规划要有一个比较大的跨度,并且要能包括你所要检测试验样品的浓度,即样品的浓度要在规范曲线浓度规划之内,包括上限和下限,而关于呈S型的规范曲线,尽量要使试验样品的浓度在中间斜度及陡段,即曲线简直成直线的规划内。

用倍比稀释法制造规范曲线中的规范样品浓度,这样就可以确保规范样品的浓度不会呈现较大的违反。

样品的浓度等目标是根据规范曲线计算出来的,所以要把做规范曲线看作是比做正式试验还要重要的一件事,否则后边的试验效果无从谈起。

做出的规范曲线相关系数因试验要求不同而有所改变,但一般来说,相关系数R至少要大于0.98,关于有些试验,至少要0.99甚至是0.999。

检测规范样品时,应按浓度递加次序进行,以削减高浓度对低浓度的影响,进步准确性。

规范曲线的样品数一般为7个点,但至少要确保有5个点。


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