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技术文章

常用三大ELISA实验方法优势劣势

阅读:672发布时间:2019-10-29

总所周知,ELISA试剂盒法可分为多种类型测定,是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的免疫剖析技能。今天,我司技能专员为您解析ELISA试验三大常用办法的优势与下风,一起跟着通蔚小编来看看吧!
一、直接法
将抗原直接固定在固相载体上,参与酶符号的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。
优势:操作手续简略,因无须运用二抗可防止交互反响。
下风:试验中的一抗都得用酶符号,但不是每种抗体都适合做符号,费用相对进步。
二、ELISA试剂盒间接法
此测定办法与直接法类似,不同在于一级抗体没有酶符号,改用酶符号的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
优势:二抗能够加强信号,ELISA试剂盒并且有多种选择能做不一样的测定剖析。不加酶符号的一级抗体则能保存它多的免疫反响性。
下风:交互反响发生的机率较高。
三、双抗体夹心法
被查看的抗原包被在两个抗体之间,其间一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。另一个则是查看抗体,此抗体可用酶符号后直接测定抗原的量;或不符号,再透过酶符号的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体有必要留心选择,才可防止交互反响或竞赛一样的抗原结合部位。
优势:高活络、高专一性,抗原无须事前纯化。
下风:抗原必定得具有两个以上的抗体结合部位。
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