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上海通蔚生物有限公司
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阅读:278发布时间:2020-2-20
经历了天然培育基、组成培育基后,无血清培育基和无血清培育成为当今细胞培育领域的一大趋势。采用无血清培育可下降出产成本,简化别离纯化步骤,防止病毒污染造成的损害。
无血清培育基是不需求增加血清就可以保持细胞在体外较长时间成长繁殖的组成培育基。可是它们或许包含单个蛋白或很多蛋白组分。
尽管基础培育基加少数血清所配制的*培育基可以满足大部分细胞培育的要求,但对有些试验却不合适,如调查一种成长因子对某种细胞的效果,这时需求扫除其他成长因子的干扰效果。
而血清中或许含有各种成长因子;又如需求测定某种细胞在培育过程中排泄某种物质的能力;或者要大规模的培育某种细胞,以获得它们的排泄产物。因而研制出无血清培育基一直是生物科学工作者努力的方针。
无血清培育基的ji本配fang为基本成分为基础培育基及增加组分两大部分。用于生物制药和疫苗出产的细胞在体外培育时,大都呈贴壁成长或兼性贴壁成长;
而当其在无血清、无蛋白培育基中成长时,由于缺乏血清中的各种粘附贴壁因子如纤粘连蛋白、层粘连蛋白、胶原、玻表粘连蛋白,细胞往往以悬浮形式成长。
增加组分包含以下几大类物质:
(1)促贴壁物质:许多细胞必须贴壁才能成长,这种情况下无血清培育基中一定要增加促贴壁和扩展因子,一般为细胞外基质,如纤连蛋白、层粘连蛋白等。
它们仍是重要的分裂素以及保持正常细胞功能的分解因子,对许多细胞的繁殖和分解,起着重要效果。纤连蛋白主要促进来自中胚层细胞的贴壁与分解,这些细胞包含成纤维细胞、肉瘤细胞、粒细胞、肾上皮细胞、肾上腺皮质细胞、CHO细胞、成肌细胞等。
(2)促成长因子及激素:针对不同细胞增加不同的成长因子。激素也是刺激细胞成长、保持细胞功能的重要物质,有些激素是许多细胞*的,如胰岛素。
(3)酶抑制剂:培育贴壁成长的细胞,需求用*消化传代,在无血清培育基中*须含酶抑制剂,以终止酶的消化效果,达到维护细胞的意图。*常用的是大豆*;抑制剂。
(4)结合蛋白和转运蛋白:常见如转铁蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的增加比较大,可增加培育基的粘度,维护细胞免受机械损害。许多旋转式培育的无血清培育基都含有牛血清白蛋白。
(5)微量元素:硒是zui常见的。
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