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上海通蔚生物有限公司
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阅读:355发布时间:2020-11-3
细胞培养的相关技术elisa试剂盒
细胞的复苏
【概述】
复苏细胞要求快速融化的手段,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化。避免
由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损害。elisa试剂盒
【用品】
培养液、吸管、离心管、培养瓶
【步骤】
[1] 打开水浴锅,将温度调至 37 ℃;
[2] 从液氮中取出冻存的细胞株,用镊子夹住冻存管(戴防护面罩),迅速置入 37 ℃的
水浴锅中,不断振摇冻存管,使之尽快融化,要在 1-2 min 内完成复温;
[3] *融化后,取出冻存管,移至超净工作台,用 75%酒精擦洗消毒,用无菌吸管吸取
细胞悬液移至无菌离心管,加 10 倍的含 10%胎牛血清的培养液,用吸管轻轻吹匀;
[4] 细胞悬液离心,1000rpm,5-8min,小心弃上清液。加入适量含 10%胎牛血清的培养
液,接种于培养瓶中,置于 37℃、5% CO2、饱和湿度孵箱中培养;elisa试剂盒
[5] 次日更换培养基,以后按常规培养方法进行培养。如果复苏时细胞密度较高及时传代。
细胞复苏时细胞密度以 5×105 个/ml。
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