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浅析孔板梯度稀释仪工艺流程

阅读：74发布时间：2023-5-2

　　孔板梯度稀释仪流程：灌注稀释液--加样--原位混匀--取换枪头--继续稀释，整个过程“一键搞定”，无需人员手工操作，开口容器上部的移动机构体积减少减小，并且易于消毒，运动机构移动速度柔和，对洁净气流的干扰降低。机型小巧，体积小巧，方便安装于层流超净工作台或局部百级净化区，也可自带FFU百级净化单元，还可增加传动与收集模块。

　　孔板梯度稀释仪方法/步骤：

　　1、通常，在96孔板的每个孔中加入100微升细胞悬浮液。从底部附近的井的左侧添加细胞悬浮液。加入一半平板后，混合细胞悬液，不要再加入，继续加入剩余的一半平板。添加完所有板后，盖上板，用左手轻轻握住板的左侧，用右手轻轻轻敲板的右边缘，注意抓力(我通常轻敲三次)。如果它太强或太多次，细胞就会被浓缩和堆积。顺时针旋转盘子(逆时针效果不好)，依次敲击剩余的三面，静置约5分钟，放入37度培养箱中。

　　2、加入细胞悬液后，抬起细胞培养板，从底部向上观察光线，看细胞是否聚集。然后从底部敲击以分散它。

　　3、如果实验室有平板振荡器，建议用这个仪器轻微振荡。效果好，即振幅小、频率高。

　　4、细胞应该尽可能分散，大多数细胞处于单一状态。离心后，悬浮!有转移到六孔板上的，就是震动!摇晃时，不要让细胞液转向，否则细胞会全部被带到中间而不均匀!

　　5、当一瓶细胞装满后，进行正常处理。将它均匀地吹进培养瓶中，然后铺上6孔板，每孔2ml。涂抹后，不用观察直接用酒精棉擦拭，然后放入培养箱中。稍微向左三圈，向右三圈，先三圈，然后三圈。基本上，24小时后，每个孔中的细胞将非常均匀。

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