上海雅吉生物科技有限公司

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小鼠心肌原代细胞(成年)
小鼠心肌原代细胞(成年)
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  • 所在地 上海市

更新时间:2019-05-29 15:13:43浏览次数:479

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【简单介绍】
小鼠心肌原代细胞(成年)是机体的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆盖于心之上。肺有分叶,左二右三,共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连,故称喉为肺之门户,鼻为肺之外窍。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来;成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显

组织来源:滑膜组织
3.产品规格:5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
小鼠心肌原代细胞(成年)分离自滑膜组织;滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构,各种关节内疾病均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构,同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎(OA)以关节软骨退行性变为特征,其病理改变累及关节的各个组成部分,但绝不仅局限于软骨,还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响,相互作用,共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的大细胞群体,是维持关节正常功能的重要组织结构,它包埋在颗粒状无定性的基质中,基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型(巨噬样滑膜细胞)、B型(成纤维样滑膜细胞)以及C型(树突细胞样滑膜细胞)细胞组成。滑膜细胞主要功能:①滑膜细胞产生润滑液成分,并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关;②滑膜细胞增生,表现为不依赖于支持物生长,并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏;③是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。
本公司生产的小鼠滑膜细胞采用混合酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息:
DMEM[H]、FBS、成纤维细胞生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用小鼠心肌原代细胞(成年)*培养基(产品货号:CM-M083)作为体外培养小鼠滑膜细胞的培养基。

细胞一般储存在液氮中,温度达-196℃,理论上储存时间是无限的。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以大限度的保存细胞活力。
  细胞复苏就是要把原本冷冻保存(冻存)着的细胞恢复到一般的生长状态,今天我们来看看原代细胞的复苏步骤。
  一、检查
  收到细胞株包裹时,请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形,若有请立即处理告诉寄方。细胞株请尽速开始培养,或立即冷冻保存(置于–70 °C,隔夜后,移到liq N2)。
  二、冷冻细胞解冻
  1、依据细胞株说明书的基础培养基种类、血清种类和其它之成份和比例,制备培养基。
  绝大多数之细胞均无法立即适应不同基础培养基或不同的血清种类,若因实验需要,必须有所不同时,务必以缓慢比例渐次改变培养基组成,确定细胞适应后,方进行所需之实验。
  2、 FBS (fetal bovine serum, 胎牛血清), CS (calfserum, 小牛血清)和HS (horseserum, 马血清),对细胞而言差异极大,请务必依据细胞株资料的血清种类培养细胞。
  3、将培养基置于37 °C 水槽中回温,回温后喷以70 % 酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。取出冷冻管,立即放入37 °C 水槽中快速解冻,水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿,否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化后,以70 % ethanol 擦拭冷冻管外部,移入无菌操作台内。
  4、依据细胞种类和浓度,于无菌操作台内取10 ml 培养基加至T25 或T75 flask中。取出已解冻之细胞悬浮液,缓缓加入T25 或T75 flask 内之培养基,混合均匀,放入37 °C,5 % CO2 培养箱培养。
  5、对绝大多数细胞而言,1 % 以下之冷冻保护剂DMSO,不会对细胞之贴附或活化有不良影响,不需立刻由解冻细胞中去除,待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。
  对极少数因对DMSO 敏感或会造成细胞分化之细胞,需立即去除DMSO 者,则可将解冻后之细胞悬浮液放入5 - 10 ml 培养基中,离心300 xg (约1000 rpm),5 分钟,小心移去上清液,加入适量新鲜培养基,将细胞均匀混合后,转移至培养瓶中,再放入37 °C, 5 % CO2 培养箱培养。
  三、收到T25 flask 细胞时的处理方式
  1. 于寄送过程中,为避免起泡造成细胞脱落死亡,T25 flask 均加满培养基。请检查flask 外观,并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象,若有任何问题,不要打开盖子,请立即通知细胞实验室。
  2. 将原封之T25 flask 静置于37 °C, 5 % CO2 培养箱中,使细胞回温至37 °C,并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。
  隔天后,于无菌操作箱内取出flask内之培养基,(取出之培养基可以再使用),仅留约5-10ml 培养基于flask 内,依一般培养方式再将细胞置入培养箱中,或细胞已长满盘,则将细胞做传代培养。
  四,细胞复苏注意事项
  1、整个复苏过程尽量手脚麻利一些,战线拉得太长可能影响复苏效果;
  2、由于“化冰”这一步里冻存管与水温差太大,尤其是液氮里来的冻存管,放到水里可能会造成翻江倒海的既视感,所以可以用镊子夹住冻存管往水里摁,这样即使有炸裂的情况也会有水做缓冲;
  3、取冻存管时要谨防冻伤,尤其是夏天,尽管热也穿长袖白大褂,一些不经意的动作可能会把你的小鲜肉“粘”到冰箱门上;
  4、离心这一步也可以在冻存管里的冰融化后直接进行,也就是直接把冻存管离心,离心后弃去原来的冻存液,然后直接加*培养基重悬细胞,接着把细胞转到培养皿/瓶里培养。这种方法也许不能将DMSO清除得很干净,但是基本影响不大。
  5、 复苏第二天记得去看看细胞,如果状态还不错的话就说明复苏成功。



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