上海雅吉生物科技有限公司
主营产品: 培养原代细胞,细胞系价格,耐药细胞株,实时荧光pcr试剂盒 |
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参考价 | ¥ 88 |
订货量 | 1 |
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- 所在地 上海市
更新时间:2019-06-04 16:45:54浏览次数:2367
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SVGp12人星形胶质细胞培养
推荐自配培养基:RPMI-1640+10%马血清+1%PS
(sciencell 货号:0513)
配套*培养基:RPMI-1640 *培养基(中乔新舟 货号:ZQ-209)
温度:37℃
气相:95%空气,5%二氧化碳
传代
收到细胞后,请对细胞培养瓶外表进行消毒,将细胞置于培养箱中进行 1-2 小时的缓
冲,待其恢复细胞基本生长状态后,将整瓶细胞及培养液分批离心并换液(换液步骤
如下),待细胞长至 85-90%传代。
1,用 75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到生物操作台内,严格无菌操作,打开细胞培养
瓶,若培养瓶上无特殊标注,以 1000rmp 5min 将所有细胞悬液分别离心后收集于离
心管中,待用;半悬浮细胞,悬浮的细胞操作同上,贴壁的细胞用 PBS 洗一遍,加
入 1ml 稀释三到四倍的胰酶消化至轻拍甁壁呈流沙样脱落,终止消化。
2,根据离心后的细胞量进行放回培养或分瓶培养,培养时瓶子平躺,培养液 6-8ml;
3,换液周期一般 2-3 天一次,换液时将所有细胞培养液 1000rmp 5mi 离心;
4,如果没有特别说明,收到细胞后的*次传代比例为 1:2,培养液必须常温。 注:1.观察细胞密度用(4X 物镜)低倍镜观察,以便正确的判断细胞密度;观
察细胞形态请用(10X 或 20X)高倍镜观察;
2.瓶中运输的培养液不能重复使用,请换新鲜培养液培养;
3.对于生长时容易聚团的悬浮细胞,若轻拍瓶壁,不能拍散,可将细胞悬液离心后,
用 PBS 重悬,再次离心后用稀释三到四倍的胰酶消化,将聚团细胞消化成单个细胞
4.收到细胞后,若发现培养瓶破损、漏液及细胞污染,请及时与我们。 保存
冻存条件:70%基础培养液+20%胎牛血清+10%DMSO
保存条件:液氮存储
供应限制 经供研究之用
常见问题及解决
SVGp12人星形胶质细胞方案
1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师
解决。
2.细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2 小时后观察,
如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留 8-10ml
培养液培养观察,细胞生长至汇合度 80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细
胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的
技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。