南京亿迅生物科技有限公司

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二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)
二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)
参考价 4935 3700
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  • 所在地 南京市

更新时间:2019-11-07 13:45:11浏览次数:1177

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【简单介绍】
级别 其他
测定意义:
核酮糖-1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶(EC 4.1.1.39)是植物光合作用中的一个关键酶,既控制着CO2的固定,同时又制约着碳素向Calvin循环和光呼吸循环分流,其活性的大小直接影响着光合速率。
二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)检测试剂盒

二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)检测试剂盒

测定原理:

Rubisco的催化下,1分子的核酮糖-15-二磷酸(RuBP)与1分子的CO2结合,产生2分子的3-磷酸甘油酸(PGA),PGA可通过外加的3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的作用,产生甘油醛-3-磷酸,并使还原型辅酶INADH)氧化。因此,340nm吸光度的变化可计算还原型辅酶I氧化速率,还原型辅酶I氧化速率可反应Rubisco的活性。

需自备的仪器和用品:

分光光度计/、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:100mL×1瓶,4保存;

试剂一:25mL×1瓶,4保存;

试剂二粉剂×1瓶,-20保存;

试剂三:粉剂×1瓶,-20保存;临用前加入100uL双蒸水充分溶解待用;

试剂四:粉剂×1瓶,-20保存;临用前加入100uL双蒸水充分溶解待用;

粗酶液制备

称取约0.1g组织加入1mL提取液,冰浴中匀浆。10000g4离心10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤:

  1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
  2. 样本测定

1)工作液的配制:临用前在试剂二中加入22.5mL试剂一,充分混匀,在37℃(哺乳动物)25℃(其它物种)孵育5min

2)在1mL石英比色皿中加入6uL样本、7uL试剂三、7uL试剂四和180uL工作液,混匀,立即记录340nm20s时吸光值A12min20s时的吸光值A2计算ΔA=A1-A2

二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)检测试剂盒



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