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南京亿迅生物科技有限公司
主营产品： 质控样品,人工血清,人工胃液,elisa试剂盒,化学试剂,生物试剂 |
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| 参考价 | ￥ 735 | ￥ 550 |
| 订货量 | 1件 | 5件 |
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- 所在地 南京市
更新时间：2019-11-07 14:57:25浏览次数：554
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碱性蛋白酶检测试剂盒
测定原理：
在碱性条件下，AKP水解酪蛋白生成酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸生成钨蓝；钨蓝在680nm有特征吸收峰，测定680nm吸光度增加速率，来计算AKP活性。
自备仪器和用品：
可见分光光度计/、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、0.5 mL EP管和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加5mL蒸馏水溶解。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加入5mL试剂一，沸水浴中磁力搅拌溶解。
试剂四：粉剂×1瓶， 4℃保存。临用前加20mL蒸馏水溶解。
试剂五：液体×1瓶，4℃保存。
标准品：液体×1支，0.25μmol/mL标准酪氨酸溶液，4℃保存。
粗酶液提取：
称取约0.1g组织，加入1mL试剂一，冰上充分研磨，10000rpm 4℃离心10min，取上清液，即粗酶液。
测定：
1.分光光度计预热30min以上，调节波长到680 nm，蒸馏水调零。
2.试剂二、试剂三和试剂四置于40℃水浴保温30min以上。
3. 空白管：取0.5 mL EP管，加入20 μL粗酶液，40 μL试剂二，混匀后置于40℃水浴保温10min；加入40μL试剂三，混匀后10000rpm 4℃离心10min；取40μL上清液，加入新的EP管，再加入200μL试剂四，40μL试剂五，混匀后置于40℃水浴保温20min，吸取200μL于680nm测定光吸收，记为A空白管。
4. 测定管：取0.5 mL EP管，加入20μL粗酶液，40μL试剂三，混匀后置于40℃水浴保温10min；加入40μL试剂二，混匀后10000rpm 4℃离心10min；取40μL上清液，加入新的EP管，再加入200μL试剂四，40μL试剂五，混匀后置于40℃水浴保温20min，吸取200μL于680nm测定光吸收，记为A测定管。（注意与空白管不同，先加试剂三，后加试剂二）
5. 标准管：取0.5 mL EP管，加入40μL标准品，200μL试剂四，40μL试剂五，混匀后置于40℃水浴保温20min，吸取200μL于680nm测定光吸收，记为A标准管。
碱性蛋白酶检测试剂盒
