南京亿迅生物科技有限公司

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乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒
乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒
参考价 230 170
订货量 1 5
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  • 所在地 南京市

更新时间:2019-11-07 11:51:19浏览次数:528

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【简单介绍】
级别 其他
测定意义:
LDH(EC 1.1.1.27)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应,伴随着NAD+/NADH之间互变。
测定原理:
LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸进一步与2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中显棕红色,颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。
乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒

乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:30mL×1瓶, 4保存;

试剂一:液体15 mL×1 4保存;

试剂二:粉剂×1支,-20保存,用时加入1.3 mL双蒸水充分溶解备用,配好后-20 保存,可保存两周,禁止反复冻融;

试剂三:液体15 mL×1瓶,4保存;

试剂四:液体50 mL×1L4保存;

样品测定的准备:

1 细菌、细胞或组织样品的制备

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,弃上清,按照每200万细菌或细胞加入400μL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3秒,间隔10秒,重复30次)。8000g4离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:称取约0.1g组织,加入1mL提取液或者生理盐水进行冰浴匀浆。8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

测定操作表(在1mL EP管中反应)

试剂名称(μL)

测定管

对照管

待测样本

50

50

试剂一

250

250

试剂二

50

 

蒸馏水

 

50

充分混匀,37(哺乳动物)或25(其它物种)水浴15min

试剂三

250

250

充分混匀,37(哺乳动物)或25(其它物种)水浴15min

试剂四

750

750

充分混匀,室温静置3分钟,450 nm下测定吸光度

注意事项:

1、粗酶液的提取必须在0 - 4中操做完成,以防止酶变性失活。测定过程中样本﹑试剂二和标准应用液必须在冰上放置。

3、由于每个样本都要做测定管和对照管,因此本试剂盒50管可测24个样本。

乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒



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