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南京亿迅生物科技有限公司
主营产品： 质控样品,人工血清,人工胃液,elisa试剂盒,化学试剂,生物试剂 |
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更新时间：2019-11-07 10:24:46浏览次数：1089
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组织及血液碱性磷酸酶(AKP/ALP)检测试剂盒
测定原理：
在碱性环境中，AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚；酚与4-氨基安替比林和铁氰hua钾反应红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通过测定510 nm吸光度增加速率，来计算AKP活性。
自备仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体×1瓶，4℃避光保存，未变成蓝绿色之前均可使用。
标准品：液体×1支（EP管中），2 μmol/mL酚标准液，4℃保存。
粗酶液提取：
准确称取约0.1g组织，加试剂一1mL充分研磨，4℃、10000rpm离心10min，取上清液待测。血液可直接用于测定，或者适当稀释后用于测定。
测定步骤：
1. 分光光度计预热30min以上，调节波长到510 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂三置于37℃水浴中预热30 min以上。
3. 空白管：取EP管，加入4μL蒸馏水，40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A空白管。
4. 标准管：取EP管，加入4μL标准品，40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A标准管。
5. 对照管： 取EP管，加入40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀；后加入4μL上清液，混匀后于510nm测定吸光度，记为A对照管。
6. 测定管：取EP管，加入4μL上清液，40μL试剂二，40μL试剂三，混匀后置于37℃水浴中保温15min；加入试剂四120μL，混匀后于510nm测定吸光度，记为A测定管。
其中标准管和空白管只需做一管，测定管和对照管每个样均需做。
注意事项：
1.试剂二、试剂三和试剂四均需避光保存。
2.试剂四变蓝绿色后不能再使用。
3.加入试剂四后必须立即混匀，否则显色不*。
组织及血液碱性磷酸酶(AKP/ALP)检测试剂盒
